2007 Fiscal Year Annual Research Report
新規膜タンパク群による活動依存的シグナル伝達の解明
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18022053
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| Research Institution | National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities |
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Principal Investigator |
岡村 康司 National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities, 岡崎統合バイオサイエンスセンター, 教授 (80201987)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大河内 善史 自然科学研究機構, 岡崎統合バイオサイエンスセンター, 特別協力研究員 (90435818)
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| Keywords | ゲノム / シグナル伝達 / 神経科学 / 蛋白質 / 生理学 |
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| Research Abstract |
(1)VSOP1について基本構造(ストイキオメトリー)を明らかにする目的でwestern blotによる解析を行った。Heat感受性のダイマーのバンドが見られ,クロスリンカーで明確なdimerの位置にバンドが見られた。共同研究者Peter Larssonと蛍光ラベルによる計測を行ったところ,FRET現象が確認され,オリゴマーであること,とくにdimerである可能性が高いことが明らかになった(PNASにin press)。VSPについては酵素との共役とゲート電流特性を明らかにし(J.Physiol.2007;J.Biol.Chem.In press),基質特異性を明らかにした(PNASにrevise中)。
(2)それぞれの電位センサー蛋白の機能を調節する因子を同定する目的で,想定される分子との共発現による免疫沈降実験,two hybridスクリーニングを行った。現時点では機能的に結合する分子は同定されていないが,条件を変えて検討中である。
(3)崎村教授らによる支援班を通じ,VSOP1のコンディショナルB6ノックアウトマウスの作成が進み,既にES細胞が樹立されたVSOP1についてはキメラマウスを作成中である。
(4)免疫組織学的解析により,成体マウス脳においてミクログリアにおけるVSOP1の発現を確認した。胎児時のミクログリアには,発現が確認されないことから,発生時期依存的な発現を起こす可能性が示唆された。
(5)VSPの電位センサー領域を用いて蛍光タンパクとの融合分子を作製し,膜電位レポーターとして開発する実験を理研の宮脇グループと共同で進め,変化率の著明に高いプローブを得て,現在分子特性とイメージングへの適用について実験を進めている(投稿中)
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Research Products
(24 results)
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[Journal Article] Detaled comparison of expressed and native voltage-gated proton channel currents
Author(s)
Musset, B., Cherny, V.V., Morgan, D., Okamura. Y., Ramsey, I.S., Clapham, D.E.& DeCoursey T.E.
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Journal Title
Peer Reviewed
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[Journal Article] Multimeric nature of voltage-gated proton channels
Author(s)
Kochi, H., Kurokawa, T., Okochi, Y., Sasaki, M., Okamura, Y., & Larsson, H.P.
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Journal Title
Peer Reviewed
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[Journal Article] Functional analysis of synaptotagmin gene regulatory regions in two distantly related ascidian species
Author(s)
Matsumoto, J., Katsuyama, Y., Ohtsuka, Y., Lemaire, P., & Okamura, Y.
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Journal Title
Develop, Growth & Differ 印刷中
Peer Reviewed
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[Presentation] How do animals utilize signals of membrane potentials:lessons from two voltage-sensing proteins2007
Author(s)
Okamura. Y., Sasaki, M., Kurokawa, T., Okcehi. Y. Hossain, M.I., Iwasaki. H. Murata, Y. & Higashijima, S
Organizer
the 6th Okazaki Biology Conference: "Maxine Biology"
Place of Presentation
Okazaki,Japan
Year and Date
20071203-08
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