2010 Fiscal Year Annual Research Report
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18109006
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
谷口 克 独立行政法人理化学研究所, 免疫制御研究グループ, グループディレクター (80110310)
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| Keywords | NKT細胞 / クローンマウス / 細胞発生分化 / ES細胞 / iPS細胞 |
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| Research Abstract |
NKT細胞分化のプロセスの研究:T細胞は胸腺に移動した前駆細胞がCD4/CD8ダブルネガティブ(DN;DN1からDN4に分画される)からCD4,CD8ダブルポジティブ(DP)を経て、CD4あるいはCD8シングルポジティブ(SP)細胞へと分化することが知られている。この知見を参考に正常マウスの胸腺内NKT細胞の分化特性を解析した。NKT細胞を規定するVa14遺伝子発現は、1)T細胞レセプター遺伝子再構成前のDN2のステージで既に発現が見られること、2)発現型Va14遺伝子再構成はDN4のステージで見られること、3)DN4ステージでは、Va14遺伝子はJa18を含む限られたJ遺伝子とin-frameで再構成していること、4)DN4細胞をNotchリガンド発現OP9ストローマ細胞上で共培養することにより、成熟NKT細胞を誘導できること、などの知見を見出した。これらの結果は、これまで知られていたNKT細胞分化プロセスとは全く異なるもので、NKT細胞が胸腺内のおけるT細胞分化過程初期において既に前駆細胞として運命づけられている可能性を示唆するものである。現在NKT細胞の分化発生に必須の遺伝子群を一細胞RT-PCRによって、絞り込みを行っている。
NKT細胞分化の場の研究:成熟NKT細胞の核を未受精卵に移植する事によって成熟NKT細胞を初期化する事に成功した。このNKT細胞クローンマウスから複数のES細胞(NKT-ES細胞)を樹立した。このNKT-ES細胞をNotchリガンド発現OP9ストローマ細胞上で共培養することにより分化成熟したNKT細胞を誘導できることを見出した。共培養途中の細胞の表現型を基に細胞を分画し、さらに共培養を行うことで、NKT細胞前駆細胞の同定に成功した。上記研究課題で絞り込まれた遺伝子群について、本分化誘導系を用いた遺伝子ノックダウン系に供し、責任遺伝子の抽出を行っている。
iPS細胞からのNKT細胞分化:末梢のマウスNKT細胞からiPS細胞の樹立に成功し、NKT-ES細胞から成熟NKT細胞分化誘導系を参考にiPS細胞から機能的に分化成熟したNKT細胞の誘導に成功した。iPS細胞由来NKT細胞は生体内に存在するNKT細胞と同等の抗腫瘍活性を有することを見出し、J Clin Invest誌に投稿した。本研究成果はNHKを始め、主要各紙に取り上げられた。
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Research Products
(16 results)
