血液型抗原発現クローン豚の作出-免疫寛容誘導法の確立-

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18380162
• Research Institution: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• Principal Investigator: 小川 晴子 Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine, 原虫病研究センター, 准教授 (10400079)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大西 彰 独立行政法人農業生物資源研究所, 発生分化研究グループ, 発生工学研究チーム長 (30414890) ; 小林 孝彰 名古屋大学, 医学部・寄附講座, 教授 (70314010)
• Keywords: 移植 / 拒絶反応 / 免疫寛容 / 血液型抗原 / クローン動物 / 核移植 / リンパ球 / ABO

Research Abstract

臓器不足を背景にABO不適合腎移植が行われているが、移植臓器に発現するABO不適合抗原に対する抗体が産生される結果、拒絶反応が発生し得る。本研究はABO不適合移植に応用する事ができる免疫寛容誘導法を確立し、同移植の安全性をより高める事を目的としている。本研究課題では、マウスを用いてABO式血液型抗原(ABO抗原)に対する免疫寛容の誘導法を検討するとともに、より人に近い大動物実験モデルとしてABO抗原を発現するクローンブタを作出し、それを用いて免疫寛容の誘導について検討する事を目指す。
平成19年度に実施した研究内容を以下に要約する。
1.遺伝子導入によりヒトのA抗原またはB抗原を定常発現するブタ胎児由来線維芽細胞を樹立し、これらの細胞をドナー細胞として用いた核移植を行うことによりA型のクローンブタを作出する事ができた。目的とする血管内皮細胞へ強くABO抗原を発現するクローンブタを得る為に、ヒト型のO抗原を更に強く発現させるための手法について検討している。
2.ヌクレオフェクション法によりB抗原を発現させたリンパ球を静脈内投与することによりマウスにおいてB抗原に対する免疫寛容を誘導する事ができた。同様の方法によりブタおよびヒヒのリンパ球にもABO抗原を発現させ得る事を確認できた。ブタにおいてA抗原またはB抗原に対して免疫寛容を誘導するための実験を行っている。
4.より効率的な遺伝子導入を実現させる目的でブタおよびヒヒのリンパ球の培養方法について検討している。
5.マウスにおいて免疫寛容または免疫順応が誘導された時のABO抗原特異的なB細胞の機能について検討している。

Research Products

• [Journal Article] Alternative strategy for overcoming ABO incompatibility (2007)
  • Author(s): Kobayashi T, Liu D, Ogawa H, Miwa Y, Nagasaka T, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Kuzuya T, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • Journal Title: Transplantation 83 Pages: 1284-1286
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prophylactic treatment of antibody-mediated rejection with high-dose mizoribine and pharmacokinetic study (2007)
  • Author(s): Liu D, Kobayashi T, Nagasaka T, Miwa Y, Ma Y, Yokoyama I, Kuzuya T, Oikawa T, Morozumi K, Uchida K, Nakao A
  • Journal Title: Transplant International 30 Pages: 365-370
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Induction of B cell tolerance to incompatible ABO Blood group antigens in transplantation (2007)
  • Author(s): Ogawa H, Galili U
  • Organizer: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • Place of Presentation: Minneapolis(USA)
  • Year and Date: 20070915-20
• [Presentation] Successful removal of blood group A/B antigen in organs by ex vivo and in vivo administration of endo-beta-galactosidase(ABasse) (2007)
  • Author(s): Kobayashi T, Ogawa H, Liu D, Nagasaka T, Miwa Y, Katayama A, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Uchida K
  • Organizer: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • Place of Presentation: Minneapolis(USA)
  • Year and Date: 20070915-20
• [Presentation] Pig kidney expressing both endo-beta-galactosidase C and hDAF prevented hyperacute rejection in baboon without antibody removal (2007)
  • Author(s): Kobayashi T, Onishi A, Liu D, Nagasaka T, Miwa Y, Katayama A, Maruyama S, Iwamoto M, Uchida K, Nakao A
  • Organizer: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • Place of Presentation: Minneapolis(USA)
  • Year and Date: 20070915-20
• [Presentation] Significance of human DAF and thrombomodulin gene transfer for coagulation control in pig to human xenotransplantation (2007)
  • Author(s): Miwa Y, Yamamoto K, Katayama A, Nagasaka T, Onishi A, Iwamoto M, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A, Kobayashi T
  • Organizer: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • Place of Presentation: Minneapolis(USA)
  • Year and Date: 20070915-20
• [Presentation] Reduction of Blood Group A/B Antigen Expression in Organ by In Vivo Infusion of endo-β-Galactosidase. (2007)
  • Author(s): Kobayashi T, Liu DG, Ogawa H, Miwa Y, Nagasaka T, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Kuzuya T, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • Organizer: American Transplant Congress 2007
  • Place of Presentation: San Francisco(USA)
  • Year and Date: 20070522-27
• [Presentation] Related versus unrelated living donor ABO-lncompatible kidney transplantation: Are spousal living donors a good source of kidneys for ABO-incompatible living transplantation? (2007)
  • Author(s): Uchida K, Katayama A, Nagasaka T, Goto N, Morozumi K, Takeda A, Goto Y, Kobayashi T, Nakao A
  • Organizer: American Transplant Congress 2007
  • Place of Presentation: San Francisco(USA)
  • Year and Date: 20070522-27
• [Presentation] Beneficial effect of human DAF and thrombomodulin expression in pig endothelial cells on coagulation control (2007)
  • Author(s): Miwa Y, Kobayashi T, Yamamoto K, Nagasaka T, Liu DG, Kuzuya T, Onishi A, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • Organizer: American Transplant Congress 2007
  • Place of Presentation: San Francisco(USA)
  • Year and Date: 20070522-27
• [Book] ABO血液型不適合移植の新戦略-2007- (2007)
  • Author(s): 小林孝考、齋藤和英
  • Total Pages: 86
  • Publisher: 日本医学館