2007 Fiscal Year Annual Research Report
抗肥満作用を有する共役脂肪酸を生合成する家畜の生産に関する研究
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18380169
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| Research Institution | Kinki University |
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Principal Investigator |
佐伯 和弘 Kinki University, 生物理工学部, 教授 (10298937)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
細井 美彦 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (70192739)
松本 和也 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (20298938)
三谷 匡 近畿大学, 先端技術総合研究所, 准教授 (10322265)
田口 善智 近畿大学, 生物理工学部, 講師 (70309269)
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| Keywords | 共役脂肪酸 / ウシ / 筋衛星細胞 / リノール酸異性化酵素遺伝子 / 脂肪細胞 / 共役リノール酸 / 腸内嫌気性細菌 |
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| Research Abstract |
共役脂肪酸の生成に関わる遺伝子について、共役リノレン酸合成酵素(α-linoleniate conjugase)およびリノール酸異性化酵素遺伝子(Linoleate isomerase)を玉川大学今村教授より分与された。α-linoleniate conjugaseはザクロおよびキカラスウリから単離された遺伝子(それぞれPgFacおよびTKFac)で、Linoleate isomeraseはウシの腸内嫌気性細菌(Propionibacterium acnes)から単離された遺伝子(PISOM)である。これら3種類に遺伝子をCAGプロモーター制御下に連結し、その下流にIRESおよびEGFPを連結した融合遺伝子含む発現ベクターを作成した。これら遺伝子の内、PAISOMは、イネヘの導入により種子内に共役リノール酸trans10, cis12の蓄積が報告されていること(Kohno-Murase, et. al.,2006)から、本年度は、構築した発現ベクターの内、PAISOMを含む発現ベクター(pCAG/PAISOM/IRES/EGFP/SV40)をウシ筋衛生細胞へ導入し、RT-PCRにより遺伝子発現の解析を行うとともに、脂肪細胞への分化能の検討を行った。その結果、7つの遺伝子導入株が得られたが、4株については細胞増殖の停止や重層化、また4継代後にEGFP遺伝子発現が消失した。3株はEGFP発現およびRT-PCRによるPAISOMの発現が認められた。これら細胞株を脂肪細胞に分化誘導したところ、Oil-RedO染色により脂質の蓄積が認められた。また、脂肪細胞への分化誘導後も安定してEGFPの発現が観察された。現在これら細胞の蓄積脂質の脂肪酸組成を検討している。
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[Presentation] アマ由来のω3脂肪酸不飽和過酵素遺伝子を導入したウシ筋衛星細胞によるクローン胚の発生2007
Author(s)
印藤頼子, 立溝篤宏, 阿部悠季, 佐伯和弘, 松本和也, 細井美彦, 鈴木石根, 木下幹朗, 三上浩司, 村田紀夫, 入谷明
Organizer
第100回日本繁殖生物学会大会
Place of Presentation
東京
Year and Date
20071018-20071022
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