2007 Fiscal Year Annual Research Report
外科的応用を目指した肝細胞、胆管細胞への分化誘導の再生医学研究
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18390343
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
寺岡 弘文 Tokyo Medical and Dental University, 難治疾患研究所, 教授 (30019137)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
有井 滋樹 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (50151171)
田中 雄二郎 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70236644)
井関 祥子 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教 (80251544)
吉岡 研一 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教 (70321916)
高瀬 浩造 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90211333)
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| Keywords | ES細胞 / 肝細胞 / 再生医療 / 細胞移植 / 肝機能障害治療 / 肝芽細胞 / ex utero移植法 / iPS細胞 |
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| Research Abstract |
肝細胞移植モデルとしては肝障害成体マウスが汎用されているが、未熟な幹(前駆)細胞の移植系としては必ずしも適当ではない。そこで、新たな移植モデルとして、ex utero法を用いたマウス胎仔肝臓への細胞の直接移植モデルの開発を目指し、実質臓器である肝臓へのex utero細胞移植に初めて成功した。まず、ED14.5胎仔肝臓から肝芽細胞(GFP+)を分離し、ED14.5胎仔肝臓に注入した。子宮に戻し5日後のED19.5に取り出して解析したところ、AFPやALBを発現するGFP+の肝細胞が広範囲に認められ、グリコーゲンの蓄積が認められ、分化・増殖が明らかとなった。さらに帝王切開で取り出した新生仔を、フォスターマザーに付けて生後6週まで成育させ、肝臓を解析したところ、AFPを発現せず、ALBの強い発現とグリコーゲンの豊富な蓄積が認められ、成熟肝細胞に分化したことが明らかとなった。また、activin-AとFGF2/EGF/HGFを組合せた無血清および単層培養によってマウスES細胞から肝芽細胞様細胞への分化誘導に成功したことから、このex utero移植法をGFP+ES細胞由来肝芽細胞様細胞に応用した結果、AFPやALBを発現するGFP+肝細胞が新生仔マウス肝臓に同様に検出された。本法が肝臓の幹(前駆)細胞の分化能や増殖能を評価する移植方法として非常に有用であることが示された。さらにマウスiPS細胞から、胚様体接着培養によっては肝細胞様細胞へ、上記の無血清・単層培養によっては肝芽細胞様細胞へと、ES細胞と同様に分化誘導させることに成功した。これら肝芽細胞様細胞のuPA/SCIDマウスへの移植実験も進行中である。
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