2007 Fiscal Year Annual Research Report
神経芽腫における倍数性・異数性染色体異常の発生機構の解明
| Project/Area Number |
18390475
|
|---|
| Research Institution | Research Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center |
|---|
Principal Investigator |
金子 安比古 Research Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center, 臨床腫瘍研究所, 所長 (50373387)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
春田 雅之 埼玉県立がんセンター, 臨床腫瘍研究所, 研究員 (80392190)
|
|---|
| Keywords | 神経芽腫 / 染色体異常 / MYCN / 異数性異常 / 倍数性異常 / 中心体異常 |
|---|
| Research Abstract |
神経芽腫は倍数性(ploidy)異常により2群に分類される。これまで私たちは、予後良好腫瘍が3倍体/5倍体で、予後不良腫瘍が2倍体/4倍体で構成され、ploidy異常が神経芽腫の予後を決定していると報告してきた。3倍体細胞に関しては、4倍体細胞がDNA複製後、3極分裂により形成されるという仮説を提唱しているが、その形成機構については未だ明らかになっていない。そこで本研究では、細胞分裂時に染色体の分配に関与する中心体に着目し、その数的異常とploidyおよびMYCNとの関係について検討した。具体的には、新鮮腫瘍27例と神経芽腫細胞株6例を対象にして、1番染色体動原体領域に特異的なDNA配列(DIZ1)、MIYTCN、および2番染色体動原体領域のD2Z1をプローブとして蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)を行い、乳児(〓18月)3倍体腫瘍8例、乳児(〓18月)2倍体腫瘍9例、小児2倍体腫瘍(>18月)10例に分類した。MYCN増幅を乳児2倍体腫瘍9例中1例、小児2倍体腫瘍10例中5例に認めたが、乳児3倍体腫瘍には認めなかった。2倍体腫瘍にtrisomy1,betrasomy1,pentasomy1をそれぞれもつ細胞が、3倍体腫瘍にtetrasomy1,pentasomy1をそれぞれもつ細胞が5%以上みられた時、ploidy divergenceありと定義した。次に、腫瘍細胞にγ-tubulin抗体による蛍光免疫染色を行い、中心体の数が3個以上ある細胞が分析細胞の5%以上を占める場合、中心体異常ありと判定した。その結果、中心体の数的異常は乳児3倍体腫瘍の13%、乳児2倍体腫瘍の56%、小児2倍体腫瘍の80%、に認められた(P=0.02)。また、中心体異常は3倍体細胞株3株中2株に認められたが、2倍体細胞株3株には認めなかった。乳児2倍体腫瘍にみられたploidy divergenceと乳児3倍体腫瘍にみられたploidy convergenceはそれぞれ、中心体の高頻度異常と低頻度異常に関係していた。3倍体細胞のほとんどに中心体異常はみられないので、3倍体細胞は2極分裂により増殖すると考えられた。MYCN増幅と中心体異常の有無との間に関係はみられなかった。中心体異常を高頻度に示す細胞株TGWの細胞分裂期の形態をtime-lapse顕微鏡を用いて観察したところ、多数の細胞は2極分裂を示したが、一部の細胞は3極分裂を示した。これらの結果から、神経芽腫では中心体の数的異常を示す腫瘍があり、その腫瘍細胞では実際に3極分裂が生じていることが分かった。今後、染色体分裂直後の細胞において、セントロメアを指標としたFISH法を行ない、染色体分配の様子を分析する予定である。また、3極分裂により形成される娘細胞の生死をtime-lapse顕微鏡で観察し、3倍体腫瘍の発生機構を解明したい。
|
-
[Journal Article] Novel risk stratification of patients with neuroblastoma by genomic signature,which is independent of molecular signatule.2008
Author(s)
Tomioka N, Oba S, Ohira M, Misra A, Fridlyand J, Ishii S, Nakamura Y, Isogai E, Hirata T, Yoshida Y, Todo S, Kaneko Y, Albertson DG, Pinkel D, Feuerstein BG, Nakaawara A.
-
Journal Title
Oncogene 27
Pages: 441-449
Peer Reviewed
-
[Journal Article] The methylation status of RASSF1A promoter predicts responsiveness to chemotherapy and eventual cure in hepatoblastoma patients.2008
Author(s)
Honda S, Haruta M, Sugawara W, Sasaki F, Ohira M, Matsunaga T, Yamaoka H, Horie H, Ohnuma N, Nakagawara A, Hjyama E, Todo S, Kaneko Y.
-
Journal Title
Peer Reviewed
-
-
[Journal Article] Duplication of paternal IGF2 or loss of maternal IGF2 imprinting occurs in half of Wilms tumors with various structural WT1Abnormalities.2008
Author(s)
Haruta M, Arai Y, Sugawara W, Watanabe N, Honda S, Ohshima J, Soejima H, Nakadate H, Okita H, Hata H, Fukuzawa M, Kaneko Y
-
Journal Title
Chromosomes Cancer (in press)
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
