2007 Fiscal Year Annual Research Report
DNA複製開始にCDKを必要としない変異、JET1の解析
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18570167
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| Research Institution | National Institute of Genetics |
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Principal Investigator |
田中 誠司 National Institute of Genetics, 細胞遺伝研究系, 助教 (50263314)
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| Keywords | DNA複製 / CDK / 細胞周期 |
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| Research Abstract |
真核細胞のゲノムDNAの複製は、各染色体上に複数存在するDNA複製起点から開始する。S期に入ると複製起点は2つのキナーゼ、CDKとCdc7により活性化され、DNA複製が開始する。この過程におけるCDKの生理的ターゲットは長年未知であったが、2002年にSld2が複製開始に必須なCDKのターゲットとして報告された。これまでの研究代表者の解析から、Sld2のリン酸化は複製開始に必要であるが十分でないことがわかった。そこで、CDKによる活性制御を受けないSld2の構成的な活性化型変異を作製し、それと合成致死となるような変異体のスクリーニングを行い、CDKなしでもDNA複製を開始する変異体(JET1)を取得した。このJET1変異体は、G1期停止、S期CDKあるいは全てのCDK活性を抑制した状態においてDNA複製を行うことができた。このJET1変異は複製因子Cdc45に起きた変異であった。また、実際のCDKのリン酸化ターゲットはCdc45ではなく、その結合パートナーであるSld3であることが分かり、DNA複製開始過程ではCDKがSld2,Sld3をリン酸化することで第3の因子であるDpb11との複合体形成を促進し、この反応をきっかけとして複製起点上で新たな分子集合が起こり、DNA複製が開始することが強く示唆された。さらに、Sld2とSld3のリン酸化をバイパスするような変異を組み合わせると、CDK活性がなくてもDNA複製を開始できることがわかった。このことは、Sld2,Sld3が複製開始における最少のCDKの基質セットを構成していることを示しており、本研究において、JET1変異を手がかりとした解析を行ったことで、真核細胞の染色体DNA複製開始における重要なステップが解明できた。
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Research Products
(8 results)
