糸状菌転写因子AmyRの誘導物質依存的核移行に関する解析

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18580073
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 小林 哲夫 Nagoya University, 生命農学研究科, 教授 (20170334)
• Keywords: Aspergillus / アミラーゼ / 転写制御 / 転写因子 / AmyR / 核局在化

Research Abstract

デンプン分解に関わる酵素遺伝子群の発現を統括する糸状菌転写因子AmyRの誘導物質依存的核移行メカニズムの解明を目的とし、以下の成果を得た。
1.AmyRは誘導物質依存的にDNA結合能を獲得すること、また、AmyRを含むタンパク質複合体の分子量が、誘導条件下で低下することを確認し、核移行シグナルのマスキング/アンマスキングが核移行制御に関与することをほぼ実証した。
2.AmyRは誘導物質依存的にリン酸化される。推定リン酸化部位の変異解析により、T424、S436、S445のアラニン置換により、AmyRが構成的に核移行することが明らかとなった。また、T424、S445の変異により転写活性化能が消失するのに対し、S436の変異では構成的な転写活性化が引き起こされた。これらの変異はいずれもMH3ドメインに存在する。MH2が転写活性化ドメインであり、MH4が核移行制御ドメインであるとする過去のデータと考え合わせ、MH2、3、4の複雑な相互作用によりAmyRの核移行や転写活性化能の制御が行われていると考えられる。