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2007 Fiscal Year Annual Research Report

血液脳関門モデルを用いたウエストナイルウイルス神経侵襲メカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number 18580302
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

木村 享史  Hokkaido University, 人獣共通感染リサーチセンター, 准教授 (90261338)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 好井 健太朗  北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教 (50421988)
澤 洋文  北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授 (30292006)
Keywordsウイルス / 脳・神経
Research Abstract

ヒト臍静脈内皮細胞(HUVEC)をトランスウエルに培養することにより作製した血液脳関門(BBB)のin vitroモデルと、ウエストナイルウイルス(WNV)ウイルス様粒子(VLPs)を利用して、以下の実験を行った。
WNV強毒株である6LP株のVLPs(6LP-VLPs)および弱毒株であるEg101株のVLPs(Eg-VLPs)をin vitro BBBモデルに感染させ、BBBを透過したVLPsの量を24時間後に測定した。トランスウエル内に接種した6LP-VLPsの約1/10量が下方のチャンバーから検出されたが、同様に接種したEg-VLPsは下方のチャンバーからほとんど検出されなかった。このように両者のin vitro BBB透過性には有意な差が認められ、ウイルスの毒力とBBB透過性との関連性が示唆された。次に6LP-VLPsのBBB透過機序の解明を試みた。タイトジャンクション(TJ)の構造変化による透過性亢進の可能性を検討するために、HUVECに6LP-VLPsを感染させ、0、8、24時間後にTJのマーカーであるZO-1の免疫染色を行った。非感染細胞と感染細胞のZO-1の局在には差がなく、WNV感染によりTJの構造は変化しないことが示唆された。また、トランスサイトーシスによってウイルスが血管内皮細胞を通過する可能性を検討するため、カベオラエンドサイトーシスの阻害剤であるFilipin、クラスリンエンドサイトーシスの阻害剤であるChlorpromazineがWNV6LP株の細胞への侵入に及ぼす影響を検討した。その結果、Chlorpromazine処理によりWNV感染が有意に減少し、WNVの血管内皮細胞への侵入にはクラスリンエンドサイトーシスが関与することが示唆された。以上より、WNVはクラスリン介在性経路を利用したトランスサイトーシスによってBBBを通過する可能性が示唆された。

  • Research Products

    (4 results)

All 2008 2007

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Pharmacological cdk inhibitor R-Roscovitine suppresses JC virus proliferation.2008

    • Author(s)
      Orba, Y., et. al.
    • Journal Title

      Virology 370

      Pages: 173-183

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ラット神経由来細胞株CSMl4.1の分化に伴う日本脳炎ウイルス感受性の変化2007

    • Author(s)
      奥村 恵, ら
    • Organizer
      第55回日本ウイルス学会学術集会
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター、札幌
    • Year and Date
      2007-10-22
  • [Presentation] Infectious entry of equine herpesvirus-1 into host cells through different endocytic pathways.2007

    • Author(s)
      Hasebe, R., et. al.
    • Organizer
      American Society for Virology 26th Annual Meeting
    • Place of Presentation
      Oregon State University, Corvallis, Oregon, U. S. A.
    • Year and Date
      2007-07-15
  • [Presentation] 犬末梢血単核球におけるCD56mRNA発現とその定量法の確立2007

    • Author(s)
      星野 有希, ら
    • Organizer
      第143回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場、つくば
    • Year and Date
      2007-04-05
    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より

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Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

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