2007 Fiscal Year Annual Research Report
腸神経系による薬物吸収制御に関する研究:特殊輸送系を介する分泌の制御機構の解明
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18590142
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
桧垣 和孝 Okayama University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (60284080)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木村 聰城郎 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (10025710)
大河原 賢一 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (30291470)
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| Keywords | 腸神経系 / P-glycoprotein / adrenaline / clonidine / Western blot / 腸管・血管同時灌流 / 刷子縁膜 / trafficking |
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| Research Abstract |
腸神経系(ENS)による薬物吸収制御に関する網羅的な検討を進める中で、本年度は、小腸における初回通過効果に影響すると考えられているP-glycoproteinによる分泌に対するENSの影響について更に詳細な検討を加えた。ラット小腸を用いた血管・腸管同時灌流法、ラット小腸粘膜を用いたin-vitro膜透過実験、およびCaco-2細胞を用いた透過実験により、P-糖タンパク質の典型的な基質であるローダミン123の透過性を検討し、P-glycoprotein活性を評価した。その結果、アドレナリン添加によるアドレナリン作動性神経亢進時には、P-glycoproteinの輸送活性は抑制されることが示された。また、アドレナリン受容体の選択的作動薬を用いた検討により、この抑制作用には粘膜下神経叢あるいは上皮細胞上の□2受容体の関与が示唆された。Caco-2細胞内のcAMPレベルを測定したところ、アドレナリン添加により低下することが示され、また、PKA阻害剤を用いることでP-glycoproteinの輸送活性が抑制傾向を示したことから、アドレナリン作動性神経亢進時に見られるP-glycoprotein活性の低下には、細胞内cAMPレベルおよびPKA活性の低下が関与していることが示唆された。さらに、ウェスタン・ブロット法により発現タンパク量を測定したところ、アドレナリン添加により、刷子縁膜上におけるP-glycoproteinの発現量が低下することが示され、輸送活性低下の直接的要因の一つであることが明らかとなった。また一方で、細胞内総発現量には変化が認められなかったことなどから、この刷子縁膜上の発現量低下は、細胞内cAMPレベルおよびPKA活性の変動を介したtraffickingの制御によるものと推察された。
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