トランスポーター活性アレイを用いた胎盤関門異物認識の全容解明

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18590154
• Research Institution: Kyoritsu University of Pharmacy
• Principal Investigator: 崔 吉道 Kyoritsu University of Pharmacy, 薬学部, 准教授 (40262589)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中島 恵美 共立薬科大学, 薬学部, 教授 (90115254) ; 巨勢 典子 共立薬科大学, 薬学部, 研究員 (60348612)
• Keywords: トランスポーター / 胎盤関門 / ヌクレオシド / 抗ウイルス薬 / 薬物間相互作用 / 異物認識 / トロホブラスト / 妊娠時薬物療法

Research Abstract

本研究は、胎盤関門における異物認識の分子基盤となるトランスポーターを中心に、胎盤関門の異物認識の全容解明を目的とした。平成19年度に得られた主な成果は以下のとおりである。
胎盤由来細胞株(TR-TBT)を用いて[^3H]ウリジンおよび[^3H]アデノシン取り込みを評価した結果、 Na^+非依存性、NBMPR感受性で、速度論的解析よりKm値は約20μMであることが明らかとなった。TR-TBT細胞のヌクレオシド取り込みクリアランスは30-60μL/mg protein/minで非常に高い活性を持つことが示された。トランスポーター遺伝子発現系を用いた検討も行ったところ同様なKm値が得られた。これらのことから、ヌクレオシドトランスポーターENT1及びENT2の寄与が考えられた。薬物間相互作用の可能性について検討した結果、これらの取り込みはシタラビン、ビダラビン、ジドブジン、ミゾリビン、カフェイン及びアミトリプチリンで用量依存的に阻害されたが、各遊離形薬物の臨床血中濃度においては内因性ヌクレオシドの阻害は起こらないものと考えられた。
さらに胎盤の抗ウイルス薬ジドブジンに対する認識を明らかにする目的でTR-TBT細胞を用いて[^3H]ジドブジン取り込みの解析を行ったところ、Na^+非依存性で飽和性(Km値約16μM)であることが明らかとなったが、NBMPR非感受性であり、また有機アニオントランスポーターのOATおよびOATP、有機カチオントランスポーターOCTなどの既存のトランスポーターに対する阻害効果も見られないことから、未知の輸送系の存在が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Characterization of the mechanism of zidovudine uptake by ratconditionanylly immortalized syncytiotrophoblast cell line TR-TBT. (2008)
  • Author(s): Sai Y, Nishimura T, Shimpo S, Chishu T, Sato K, Kose N, TerasakiT, Mukai C, Kitagaki S, Miyakoshi N, Kang YS, Nakashima E.
  • Journal Title: Pharm Res (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Potential of various drugs to inhibit nucleoside uptake in ratsyncytiotrophoblast cell line,TR-TBT 18d-1. (2008)
  • Author(s): Chishu T, Sai Y, Nishimura T, Sato K, Kose N, Nakashima E.
  • Journal Title: Placenta (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Involvement of multidrug resistance-associated protein 2(Abcc2)in molecular weight-dependent biliary excretion of{beta}-lactam antibiotics. (2008)
  • Author(s): Kato Y, Takahara S, Kato S, Kubo Y, Sai Y, Tamai I, Yabuuchi H, Tsuji A.
  • Journal Title: Drug Metab Dispos (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transport of carnitine and acetylcarnitine by carnitine/organic cation transporter(OCTN)2 and OCTN3 into epididymal spermatozoa. (2007)
  • Author(s): Kobayashi D, Tamai I, Sai Y, Yoshida K, Wakayama T, Kido Y, Nezu J, Iseki S, Tsuji A.
  • Journal Title: Reproduction 134 Pages: 651-658
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Heterophilic binding of the adhesion molecules poliovirus receptor and immunoglobulin superfamiy 4A in the interactio between mouse spermatogenic and Sertoli cells. (2007)
  • Author(s): Wakayama T, Sai Y, Ito A, Kato Y, Murakami Y, Nakashima E, Tsuji A, Kitamura Y, Iseki S.
  • Journal Title: Biol Reprod 76 Pages: 1081-1090
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Altered expression of basement membrane-related molecules in rat brain pericyte,endothehal, and astrocyte cell lines after trans forming growth factor-β1 treatment. (2007)
  • Author(s): Kose N, Asashima T, Muta M, Iizasa H, Sai Y, Terasaki T, Nakashima E.
  • Journal Title: Drug Metab Pharmacokinet 22 Pages: 255-266
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Hepatocyte growth factor and c-Met expression in pericytes:implications for atherosclerotic plaque development. (2007)
  • Author(s): Liu Y, Wilkinson F, Kirton J, Jeziorska M, Iizasa H, Sai Y, Nakashima E, Heagerty A, Canfield A, Alexander M.
  • Journal Title: J Pathol 212 Pages: 12-19
  • Peer Reviewed
• [Presentation] DHEASによるラット胎盤トロホブラスト細胞のzidovudine取り込み促進. (2008)
  • Author(s): 関 善彬、西村 友宏、巨勢 典子、崔 吉道、中島 恵美.
  • Organizer: 日本薬学会第128年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2008-03-26
• [Presentation] 1 (2007)
  • Author(s): Sai Y, Ochi K, Kose N, Nishiimura T, Nakashima E..
  • Organizer: 4th World Conference on Drug Absorption, Transport and Dglivery
  • Place of Presentation: Kanazawa,Japan
  • Year and Date: 20070620-21
• [Presentation] 胎盤細胞株を用いたヌクレオシド/ヌクレオベース取り込み機構の解明及び薬物との相互作用の検討. (2007)
  • Author(s): 地主 拓也、佐藤 和子、西村 友宏、崔 吉道、中島 恵美.
  • Organizer: 第1回次世代を担う若手医療薬科学部会シンポジウム
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-12-15
• [Presentation] 血液-胎盤関門におけるエリスロマイシン取り込み輸送機構の解析. (2007)
  • Author(s): 高木 彰紀、越智 香織、西村 友宏、崔 吉道、中島 恵美.
  • Organizer: 第1回次世代を担う若手医療薬科学部会シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-12-15
• [Presentation] TR-TBT 18d-1及びラット胎盤刷子縁膜小胞を用いたエリスロマイシン取り込み機構解析. (2007)
  • Author(s): 高木 彰紀、越智 香織、西村 友宏、崔 吉道、中島 恵美.
  • Organizer: トランスポーター研究会第1回関東部会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-12-10
• [Presentation] 胎盤関門細胞を用いた薬物・栄養素輸送研究. (2007)
  • Author(s): 崔 吉道、西村 友宏、飯笹 久、巨勢 典子、中島 恵美.
  • Organizer: 第29回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-11-27
• [Presentation] ラット血液-胎盤関門におけるエリスロマイシンの輸送機構. (2007)
  • Author(s): 高木 彰紀、越智 香織、崔 吉道、西村 友宏、中島 恵美.
  • Organizer: 第29回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-11-27
• [Presentation] ラット胎盤細胞株を用いたヌクレオシド/ヌクレオベースの母体-胎児血輸送における薬物の相互作用解析. (2007)
  • Author(s): 地主 拓也、崔 吉道、巨勢 典子、佐藤 和子、西村 友宏、中島 恵美.
  • Organizer: 第29回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-11-27
• [Presentation] 薬物輸送駆動力解明に用いるラット胎盤刷子縁膜小胞の方向性及び精製度評価. (2007)
  • Author(s): 高木 彰紀、西村 友宏、崔 吉道、中島 恵美.
  • Organizer: トランスポーター研究会第1回東北部会
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-11-27
• [Presentation] Characterization of the placental transport mechanism of erythromycin using syncytiotrophoblast cell line TR-TBT 18d-1. (2007)
  • Author(s): Nishimura T, Sai Y, Ochi K, Kose N, Nakashima E..
  • Organizer: 2007AAPS Annual Meeting and Exposition
  • Place of Presentation: San Diego,CA
  • Year and Date: 2007-11-15
• [Presentation] The expression levels of ERM during pregnancy and role of ezrin in localization of GLUT1 and P-glycoprotein in placenta. (2007)
  • Author(s): Higuchi K, Wada M, Deguchi M, Horieya S, Kose N, Nishimura T, Sai Y, Wakayama T, Tamura A, Tsukita S, Nakashima E..
  • Organizer: 2007AAPS Annual Meeting and Exposition
  • Place of Presentation: San Diego,CA
  • Year and Date: 2007-11-15
• [Presentation] Involvement of nucleoside transporters in the uptake of anti-HIV drugs,2',3'-dideoxyinosine and 3'-azido-3'-deoxythimidine by a conditionally immortalized syncytiotrophoblast cell line,TR-TBT. (2007)
  • Author(s): Nisimura T, Sato K, Sai Y, Kose N, Shimpo S, Nakashima E..
  • Organizer: 8th International ISSX Meeting/日本薬物動態学会第22年会
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-10-12
• [Presentation] Quantitative analysis of mRNA expression level of ABC transporters inrat phmary cultured syncytiotrophoblasts and conditionally immortalized syncytiotrophoblast cell line, TR-TBTs. (2007)
  • Author(s): Sai Y, Maeda T, Koizumi T, Kose N, Nishimura T, Nakashima E..
  • Organizer: 8th International ISSX Meeting/日本薬物動態学会第22年会
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-10-12
• [Presentation] Functional characteridzation of nucleoside analogues uptake at the placenta and its relevance to drug interaction. (2007)
  • Author(s): Sato K, Chisyu T, Sai Y, Nishimura T, Kose N, Nakashima E..
  • Organizer: 日本薬物動態学会ビジョン・シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-07-19
• [Presentation] mRNA Expression levels of ABC transporter family in highly purified rat syncytiotrophoblasts in the late stage of pregnancy. (2007)
  • Author(s): Maeda T, Sai Y, Nishimura T, Kose N, Nakashima E..
  • Organizer: 日本薬物動態学会ビジョン・シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-07-19
• [Presentation] Alteration of expression level of ezrin duridng pregnancy and influence to the locahzation of GLUT1 and P-gp in the placenta. (2007)
  • Author(s): Higuchi K, Wada M, Deguchi M, Horieya S, Kose N, Nishimura T, Sai Y, Wakayama T, Tamura A, Tsukita S, Nakashima E..
  • Organizer: 日本薬物動態学会ビジョン・シンポジウム
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-07-19
• [Presentation] Transport mechanism and drug sensitivity of uridine,adenosine and hypoxanthine influx from apical membrane of rat syncytiotrophoblast cell line,TR-TBT 18d-1. (2007)
  • Author(s): Chishu T, Sai Y, Kose N, Sato K, Nishimura T, Nakashima E..
  • Organizer: 4th World Conference on Drug Absorption, Transport and Delivery
  • Place of Presentation: Kanazawa,Japan
  • Year and Date: 2007-06-21
• [Presentation] ラット胎盤におけるezrinの発現変動とP-glycoproteinおよびGLUT1細胞内局在への影響. (2007)
  • Author(s): 崔 吉道、樋口 慧、和田 真実、巨勢 典子、西村 友宏、田村 淳、月田 早智子、若山 友彦、中島 恵美.
  • Organizer: 第2回トランスポーター研究会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2007-06-09
• [Presentation] 妊娠経過に伴う胎盤のezrin発現レベルと局在の変動. (2007)
  • Author(s): 樋口 慧、和田 真実、崔 吉道、巨勢 典子、田村 淳、月田 早智子、若山 友彦、中島 恵姜.
  • Organizer: 日本薬剤学会第22年会
  • Place of Presentation: 大宮
  • Year and Date: 2007-05-21
• [Presentation] Uptake mechanisms of anti-HIV drugs,2',3'-dideoxyinosine and 3'-azido-3'-deoxythimidine by a conditionally immortalized syllcytiotrophoblast cell line, TR-TBT. (2007)
  • Author(s): Sato K, Sai Y, Kose N, Shimpo S, Nakashima E..
  • Organizer: PSWC2007
  • Place of Presentation: Amsterdam
  • Year and Date: 2007-04-25
• [Book] トランスポーター科学最前線 (2008)
  • Author(s): 崔 吉道
  • Total Pages: 22
  • Publisher: 京都廣川書店
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より