歯胚発生過程におけるThymosin beta 4の機能解析

2006 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18590169
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 小林 家吉 九州大学, 大学院歯学研究院, 助教授 (40243951)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坂井 英隆 九州大学, 大学院歯学研究院, 教授 (80136499) ; 清島 保 九州大学, 大学院歯学研究院, 助手 (20264054)
• Keywords: 発生学 / 形態形成学 / 歯胚 / ノックダウン法

Research Abstract

本年度において、歯原性上皮細胞培養下、Thymosin beta (Tb)4遺伝子発現ついてノックダウン法を用いて機能解析を行い、歯原性上皮細胞におけるTb4の役割の一端を明らかにした。オリゴヌクレオチドプローブを用いてアンチセンス法によりTb4の翻訳段階で特異的にノックダウンしTb4の機能解析を行った。抑制実験後、培養細胞よりtotal RNAを抽出し、Real-time PCRによるTb4,Matrix metalloproteinase 2/9(MMP-2/-9),Hepatocyte growth factor receptor (c-Met),Dentin sialophosphoprotein (DSPP),Cytokeratin (CK)14,Dentinmarixprotein (DMP)1,amelogenin (AMGN)およびEnamelin (ENAM)の定量解析解析を行った。
以前、コントロールとアンチセンス処理した下顎の半定量的解析を行った結果、Tb4,MMP-2/-9いずれも発現量の低下がみられた。細胞を用いた今回の検索でも、Tb4およびMMP-2/-9に有意な発現低下をみとめた。さらに、DSPP, CK14,DMP1,AMGNならびにENAMにも有意な発現低がみられた。今回の結果より、歯胚上皮細胞において、Tb4がMMP-2/-9の発現に関与していることが示唆され、過去の報告から、HGFによるTb4のup-regulateがMMP-2の発現に関与していることや、HGFがMMP-9の転写活性に関与していることから、Tb4を介したMMP-2/-9の発現調節機構が、歯胚上皮基底膜のリモデリングに関与しているものと考える。現在、この結果をまとめて投稿準備中である。