2007 Fiscal Year Annual Research Report
歯胚発生過程におけるThymosin beta 4の機能解析
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18590169
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
小林 家吉 Kyushu University, 大学院・歯学研究院, 准教授 (40243951)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂井 英隆 九州大学, 大学院・歯学研究院, 教授 (80136499)
清島 保 九州大学, 大学院・歯学研究院, 助教 (20264054)
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| Keywords | 発生学 / 形態形成学 / 歯胚 / ノックダウン法 / Thymosin beta 4 / Nucleolin / アンチセンス核酸法 / Runx2 |
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| Research Abstract |
本課題は、歯胚肇生過程におけるThymosin beta 4(Tb4)の役割を明らかにすることを目的とした。平成19年度には、マウス胎生11日齢(E11.0)下顎ならびにE15.0歯胚の器官培養条件下、Tb4遺伝子発現のノットクダウン法を用いで機能解析を行った。ノックダウン法としではアシチセンス・オリゴ法を用いた。さらに、歯原性上皮を用いて、同様にTb4の機能解析を行った。器官培養下アンチセンス・オリゴ法によるTb4の機能解析の結果、E11.0歯胚上皮の陥入が障害され、E15.0歯胚では象牙質・エナメル質形成障害がみられた。これより、Tb4は歯胚上皮の陥入ならびに象牙質・エナメル質形成に関与している事が明らかとなった。さらに、歯胚上皮細胞を用いて同様にTb4発現のノックダウンを行い、mRNAの定量解析を行った結果、matrixmetalloproteinase(MMP)-2/-9、NucleolinならびにtypeII/III Runx2/Cbfa1に有意な発現低下を認めた。また、歯原性因子Dentin sialophosphoprotein、Dentin marix protein 1 Enamelinも有意な発現低下を示した。歯原性細胞を用いたin vitro結果より、Tb4はMMP-2/-9、Nucleolin、typeII/III Runx2/Cbfa1の発現に関与しており、Tb4は歯胚発生過程においてこれらの因子の上位に位置するレギュレーターとして捉えることが出来た。また、同実験方法を用いてTb4の関与が示唆されたNucleolinの機能解析も行い、歯胚形態形成におけるNucleolinの関与についてJoumal of Biological Chemistry誌に発表した(2007年8月)。
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