2007 Fiscal Year Annual Research Report
性腺ステロイドホルモンが海馬機能に及ぼす影響と性差
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18590219
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
美津島 大 Yokohama City University, 医学研究科, 准教授 (70264603)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 冨久子 (貴邑 冨久子) 横浜市立大学, 医学研究科, 客員教授 (40046066)
舩橋 利也 横浜市立大学, 医学研究科, 准教授 (70229102)
高瀬 堅吉 横浜市立大学, 医学部, 助手 (80381474)
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| Keywords | 性分化 / エストロジェン / テストステロン / 学習・記憶 / アセチルコリン / 自発行動量 / ストレス / 性分化 |
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| Research Abstract |
雌雄のウィスター系ラットを実験に用いる。性腺の摘除および性腺ステロイドホルモンの処置は実験の2週間前に行い、20%17β-estradiol封入チューブ(体重250gあたり15mm)、100%testosterone封入チューブ(体重250gあたり30mm)を背側皮下に植え込み、2週間後に実験を行った。In vivo microdialysis実験はペントバルビタール麻酔下で、脳定位固定装置を用いて背側海馬にガイドカニューラを植え込み、固定した。実験前日に、microdialysis用プローブ(Eicom Co.外径0.31mm)をガイドカニューラを介して、背側海馬に刺入した。人工脳脊髄液を1.2μl/分の流速で環流しながら自由行動状態を維持し、翌日からin vivo microdialysis実験を行い、20分ごとに24時間以上連続して脳内環流液の採取とAChの定量を続けた。同時に、各ラットの自発行動量をACTMONITORを用いて数値化し、ACh分泌量との相関解析も行った。その結果、雄性におけるtestosteroneや雌性における17β-estradiolは、ACh分泌量と自発行動量の相関を維持することが判明した。また、この相関は背側海馬のCA1領域で特に顕著であることが判明した。CA3やDG領域でも正の相関は得られたが、CA1領域と比べて有意に低かった。次に、海馬各領域におけるAChの作用をニューロン・シナプスレベルで検討するため、急性スライスを作成した。氷冷したコリンバッファーによる環流を行い、速やかに脳を取り出した。厚さ300μmの海馬体を含む冠状断切片をバイブラトームで作成し、人工脳脊髄液で切片を環流した。パッチクランプ法で50μMのカルバコール(ACh agonist)に対する影響を検討したところ、カルバコールはCA1錐体細胞に特異的にAMPA受容体を介した自発性EPSCを有意に増加させることが判明した。
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