2006 Fiscal Year Annual Research Report
悪性腫瘍、神経変性疾患でのスフィンゴシンキナーゼの発現異常の解析と病態での意義
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18590526
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
村手 隆 名古屋大学, 医学部, 教授 (30239537)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小嶋 哲人 名古屋大学, 医学部, 教授 (40161913)
高木 明 名古屋大学, 医学部, 助手 (30135371)
坂野 喜子 岐阜大学, 医学部, 助教授 (50116852)
野澤 義則 岐阜県国際バイオ研究所, 研究所長 (10021362)
鈴木 元 名古屋大学, 大学院医学系研究科, 講師 (80236017)
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| Keywords | sphingosine kinase 1 / quantitative RT-PCR / myelodysplastic syndromes / acute leukemia / RET signal / promoter analysis / GDNF / MEN2 type tumor |
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| Research Abstract |
1.骨髄異形成症候群(MDS)および急性白血病(AL)骨髄におけるスフィンゴ脂質代謝酵素発現量の解析 定量RT-PCRを用いてMDSおよびAL骨髄における各種スフィンゴ脂質代謝酵素の発現量を定量した。同時に多剤耐性遺伝子(MDR)および抗アポトーシス遺伝子BCL-2の発現も測定した。内部対照としてはABL遺伝子を用いた。
測定の結果、sphingosine kmase 1(SPHK1)の発現がhigh nsk MDS並びにALで正常に比較して上昇していた。一方、neutral sphmgomyelinase 2(NSMase2)はMDS, ALで正常に比較して低下していた。これは白血病およびMDSにおいては細胞内のsphmgolipid代謝がanti-apopticに傾斜している可能性を示している。我々の結果はSPHK1の阻害剤がこれら疾患の良い治療薬になる可能性を示唆した。
2.神経系のサイトカインであるGDNF反応性神経芽細胞株TGWを用いてGDNFおよびその受容体RETの下流にSPHK1が素材すること、またRETの変異しておこるMEN2 type腫瘍においてSPHK1が腫瘍化機序に一定の役割を果たしていることをMEN2 type変異RET遺伝子を導入した細胞株において解析した。
解析の結果、RETからのシグナルはERK、PI3K pathwayを経由してSPHK1 messageの発現を増加させることを明らかにし責任プロモーター部位を同定した。またTGW細胞においてGDNF刺激による神経系の細胞分化にSPHK1が必須であることも証明した。MEN2A typeの腫瘍ではSPHKl発現が恒常的に上昇しそれが腫瘍化にポジティブに働いていることを明らかにした。
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