膵癌細胞における上皮由来増殖因子シグナルの解析とアポトーシス抵抗性機序の解明

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18590745
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 樋口 肇 Keio University, 医学部, 講師 (20306682)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高石 官均 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (80286468) ; 泉谷 幹子 慶應義塾大学, 医学部, 嘱託(非常勤) (70342657)
• Keywords: 膵癌 / アポトーシス / EGFシグナル / cancer stem cell

Research Abstract

膵癌細胞におけるEGF受容体の発現レベルとアポトーシス感受性の相関を解析するため、real time PCR法により膵癌細胞株のEGF受容体mRNA発現レベルを、western blot法によりEGF受容体蛋白レベルを解析した。膵癌細胞株として、Panc-1、MIA PaCa-2, Capan-1、Capan-2、BxPC-3を用いた。アポトーシス感受性感受性解析は、annexin V染色法、DAPI染色による蛍光顕微鏡観察を行った。アポトーシスの誘導は、抗がん剤(5-fluorouracil,cisplatin,bleomycin)、TNF-related apoptosis-inducing ligand(TRAIL)、放射線照射を用いた。しかしながら解析した細胞株において、EGF受容体発現レベルとアポトーシス感受性の間に明らかな相関関係は認められなかった。また、EGF受容体遺伝子変異をdirect sequencing法にて解析したが、上記細胞株において明らかな受容体変異は認められなかった。
そこで次に我々は、上記膵癌細胞を用いてside population(SP)法を用いた癌幹細胞の分離培養を行った。分離したSP細胞は、非SP細胞と比較して腫瘍形成能が高く、アポトーシス抵抗性であることが明らかになった。さらに、TGF-betaあるいはEGFによるepithelial-mesenchymal transition(EMT)を誘導した際には、SP細胞において顕著なEMTが観察され、著しい転移、浸潤能の増強作用が観察された。抗癌剤抵抗性のSP細胞は、膵癌における転移、浸潤を抑制するための標的細胞と考えられ、本研究の結果は、あらたな分子標的治療を構築する上で重要な事実を提供するものと考えられた。

Research Products

• [Presentation] Transforming growth factor(TGF)-bate induces pancreatic cancer cell invasion and epithelial to mesenchymal(EMT)in side-population(SP)cells but not in non SP cells (2007)
  • Author(s): Kabashima A, Higuchi H, Matsuzaki Y, Hasegawa G, Kuriyama N, Takaishi H, Izumiya M, izuka H, Sakai G, and Hibi T.
  • Organizer: 2007 AACR Annual Meeting
  • Place of Presentation: Los Angeles,CA
  • Year and Date: 20070415-18
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [Presentation] Mcl-1 depletion sensitizes the apoptosis of gastrointestinal cancer cells mediated by anti-cancer drugs (2007)
  • Author(s): Iizuka H, Higuchi H, Suminmoto H, Kabashima A, Kuriy ama N, Sakai G, Izumiya M, Ymagishi Y, Takaishi H, Kawakami Y, Mizoeuchi H. and Hibi T.
  • Organizer: 2007 AACR Annual Meeting
  • Place of Presentation: Los Angeles,CA
  • Year and Date: 20070415-18
  • Description: 「研究成果報告書概要(和文)」より