酸化ストレスに対する生体応答としての動脈硬化初期病変形成能と治療法の開発

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18591005
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 及川 眞一 Nippon Medical School, 医学部, 教授 (30142946)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮澤 陽夫 東北大学, 農学部, 教授 (20157639)
• Keywords: 細胞接着 / 接着分子 / PCOOH / ヒドロペルオキシド / 単球 / LFA-1

Research Abstract

昨年までと同様にフォスファチジルコリンの酸化物であるヒドロペルオキシドPCOOH、およびその代謝産物を用いてヒト単球由来細胞(THP-1)の接着能を検討した。すなわち血管内皮細胞表面に発現する各種の接着分子(ICAM-1,VCAM-1,E-selectin)を予め96-well培養プレートにコーティングし、THP-1細胞をPCOOH添加培地で培養後、プレートに接着した細胞数を計測した。これまでの成績ではPCOOHは濃度依存性(2.5〜20μM)、時間依存性(5〜15分)にICAM-1とVACM-1に対するTHP-1細胞の接着を誘導した。一方、E-Selectinに対する接着亢進は誘導されなかった。このような実験系において、THP-1細胞の膜表面におけるβ2インテグリン分子種の関与を検討した。CD11a、CD11b、CD11c、CD18に対する抗体がPCOOH-10μMで誘導される接着に対する影響を検討すると、抗CD11a抗体、抗CD18抗体はこれを阻止した。したがって、THP-1細胞膜のLFA-1(CD11a/CD18のヘテロダイマー)がPCOOHによって影響を受ける接着分子であることが認められた。しかし、FACSによる解析ではLFA-1の発現量が接着能を亢進させるものではないと考えられ、LFA-1の量的変化に依存しない他の機序を考慮することが必要と考えられた。そこで、LFA-1の膜表面における局在性に着目して検討を行った。その結果、PCOOHの培地内添加は細胞の擬足様突起の出現を誘導し、THP-1細胞の著名な形態変化を促した。免疫染色法によりCD11aはこの擬足様突起部位で濃染され、同時に重合したF-actinが染色された。細胞接着を強力に誘導するPMAはこのような形態変化を誘導しないことから、PCOOHによる接着誘導の亢進機序はPMAとは全く異なると考えられた。このような成果を元に、次年度は生体材料としてマウスおよびヒト末梢血白血球から単球を分離し、その接着能に対するPCOOHの作用を検討し、病態との関連性を明らかにする。

Research Products

• [Journal Article] Association of single-nucleotide polymorphisms in MTMR9 gene with obesity (2007)
  • Author(s): Yanagiya T, Tanabe A, Iida A, Saito S, Sekine A, Takahashi A, Tsunoda T, Kamohara S, Nakata Y, Kotani K, Komatsu R, Itoh N, Mineo I, Wada J, Masuzaki H, Yoneda M, Nakajima A, Miyazaki S, Tokunaga K, Kawamoto M, Funahashi T, Hamaguchi K, Tanaka K, Yamada K, Hanafusa T, Oikawa S, Yoshimatsu H, Nakao K, Sakata T, Matsuzawa Y, Kamatani N, Nakamura Y, Hotta K
  • Journal Title: Hum Mol Genet 16 Pages: 3017-3026
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Food-grade mulberry powder enriched with 1-deoxynojirimycin suppresses the elevation of postprandial blood glucose in humans (2007)
  • Author(s): Kimura T, Nakagawa K, Kubota H, Kojima Y, Goto Y, Yamagishi K, Oita S, Oikawa S, Miyazawa T
  • Journal Title: J Agric Food Chem 55 Pages: 5869-5874
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ion-trap tandem mass spectrometric analysis of squalene monohydroperoxide isomers in sunlight-exposed human skin (2007)
  • Author(s): Nakagawa K, Ibusuki D, Suzuki Y, Yamashita S, Higuchi O, Oikawa S, Miyazawa T
  • Journal Title: J Lipid Res 48 Pages: 2779-2787
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Occurrence of orally administered mulberry 1-Deoxynojirimycin in rat plasma (2007)
  • Author(s): Nakagawa K, Kubota H, Kimura T, Yamashita S, Tsuzuki T, Oikawa S, Miyazawa T
  • Journal Title: J Agric. Food Cehm 55 Pages: 8928-8933
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Polymorphisms of apolipoprotein E and methylenetetrahydrofolate reductase in the Japanese population (2007)
  • Author(s): Arai H, Yamamoto A, Matsuzawa Y, Saito Y, Yamada N, Oikawa S, Mabuchi H, Teramoto T, Sasaki J, Nakaya N, Itakura H, Ishikawa Y, Ouchil Y, Horibe H, Egashira T, Hattori H, Kita T
  • Journal Title: J Atheroscler Thromb 14 Pages: 167-171
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] In vivo angiogenesis is suppressed by unsaturated vitamin E, tocotorienol (2007)
  • Author(s): Nakagawa K, Shibata A, Yamashita S, Tsuzuki T, Kariya J, Oikawa S, Miyazawa T
  • Journal Title: J Nutr 137 Pages: 1938-1943
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Effect of hypertension and type2 diabetes meliitus on the risk of total cardiovascular events in Japanese patients with hypercholesterolemia: Implications from the Japan Lipid Intervention Trial(J-LIT) (2007)
  • Author(s): Shimamoto K, Kita T, Mabuchi H, Matsuzaki M, Matsuzawa Y, Nakaya N, Oikawa S, Saito Y, Sasaki J, Itakura H, and the J-LIT Study group
  • Journal Title: Hypertens Res 30 Pages: 119-123
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-term Outcome after Living Donor Liver Transplantation for Two Cases of Homozygous Familial Hypercholesterolemia from a Heterozygous Donor (2007)
  • Author(s): Kawagishi N, Satoh K, Akamatsu Y, Sekiguchi S, Ishigaki Y, Oikawa S, and Satomi S
  • Journal Title: J Atheroscl Thromb 14 Pages: 94-97
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Effects of EPA on Coronary Artery Disease in Patients with Gluco-Metabolism Derangement: JELIS Subgroup Analysis (2008)
  • Author(s): Oikawa S, Yokoyama M, Origasa H, Matsuzaki M, Saito Y, Matsuzawa Y, for the JELIS Investigators
  • Organizer: 第72回日本循環器病学会
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 2008-03-29
• [Presentation] Effects of EPA on coronary artery disease in patients with gluco-metabolism derangement: JELIS subgroup analysis (2007)
  • Author(s): Oikawa S, Yokoyama H, Origasa M, Matsuzaki M, Saito Y, Matsuzawa Y
  • Organizer: 第43回欧州糖尿病学会年次集会
  • Place of Presentation: アムステルダム
  • Year and Date: 2007-09-20
• [Presentation] 糖尿病の大血管症を進めないために (2007)
  • Author(s): 及川眞一
  • Organizer: 第50回日本糖尿病学会総会
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-05-26
• [Presentation] 糖尿病または高血糖を伴う高脂血症患者における冠動脈イベント発症率と EPA の発症抑制効果:JELISサブグループ解析 (2007)
  • Author(s): 及川眞一, 横山光宏, 折笠秀樹, 松崎益徳、松澤佑次, 齋藤 康, 石川雄一, 佐々木 淳、菱田仁士, 板倉弘重, 北 徹北畠 顯, 中谷矩章, 坂田利家, 島田和幸、白土邦男, JELIS研究会
  • Organizer: 第50回日本糖尿病学会総会
  • Place of Presentation: 仙台
  • Year and Date: 2007-05-26