2007 Fiscal Year Annual Research Report
甲状腺ホルモン受容体βに特異的に結合するタンパクの機能解析
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18591018
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
加納 安彦 Nagoya University, 環境医学研究所, 助教 (50252292)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 良敬 名古屋大学, 環境医学研究所, 准教授 (80420363)
高岸 芳子 名古屋大学, 環境医学研究所, 助教 (50024659)
村田 善晴 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (80174308)
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| Keywords | 甲状腺ホルモン不応症 / 甲状腺ホルモン受容体 / コアクチベーター / 酵母Two-Hybridシステム / cDNA / クローニング |
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| Research Abstract |
甲状腺ホルモン不応症には2種類の甲状腺ホルモン受容体(TR)になんらの異常を持たない症例がある.その原因として、甲状腺ホルモン受容体βに特異的に結合するコアクチベーターが存在し、何らかの異常を持っているのではないかと想定した.そこで、酵母Two-Hybridシステムにより、ヒト肝cDNAライブラリーよりTRβと特異的に結合するタンパクのcDNAのクローニングを試み、タンパクの機能がいまだ不明な2種類のcDNAを同定した.
1.クローンNo.60には3種類のmRNAが存在し、すべての全長cDNAをクローニングした.決定した塩基配列とアミノ酸配列より、コードされるタンパクが核内の存在することが推測された.
2.推測されたアミノ酸配列には、既に報告のある核内タンパクと高い相同性があることが明らかになった.
3.In vitroでのpull-downアッセイを行うため、TRβをGST融合タンパクとして、クローン60タンパクをHis-tag融合タンパクとして、いずれも大腸菌で発現させた.
4.融合タンパクを相互作用させ、免疫沈降反応後SDS-PAGE/ウェスタンブット法によって両タンパクの結合を検討した結果、確かにクローン60タンパクがTRβと結合していることを確認した.
5.クローン93タンパクは、His-tagタンパクとしての高発現させることができず、in vitroでの相互作用は確認できなかった.
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[Journal Article] Mapping of jog locus to the region between D6Mit104 and D6Mit336 on mouse chromosome 6.2007
Author(s)
Sun, XY., Kanou, Y., Takagishi, Y., Hayashi, Y., Murata, Y., 他3名
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Journal Title
Experimental Animal 56
Pages: 389-392
Peer Reviewed
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[Journal Article] Insertion of an intracisternal A particle retrotransposon element in plasma membrane calcium ATPase 2 gene attenuates its ecpression and produces an ataxic phenotype in joggle mutant mice.2007
Author(s)
Sun, XY., Hayashi, Y., Kanou, Y., Takagishi, Y., Murata, Y., 他2名
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Journal Title
Peer Reviewed
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