2006 Fiscal Year Annual Research Report
Runx1の標的遺伝子の網羅的スクリーニングおよび発生工学的機能解析
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18591086
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Dokkyo Medical University |
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Principal Investigator |
山形 哲也 獨協医科大学, 医学部, 助教授 (30424047)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
江口 真理子 獨協医科大学, 医学部, 講師 (40420781)
江口 峰斉 獨協医科大学, 医学部, 講師 (50420782)
牧 和宏 獨協医科大学, 医学部, 講師 (50337391)
佐々木 光 獨協医科大学, 医学部, 講師 (60282638)
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| Keywords | Ruxn1 / AML1 / 造血 / 白血病 / ES細胞 |
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| Research Abstract |
1.Runx1の標的候補遺伝子の網羅的検索
Runx1遺伝子の野生型および欠損型の造血組織を得るために、Cre蛋白の発現により条件的にRupx1を欠損させるマウスを作製中である。Runx1-loxPマウスにMx1-Cre(インターフェロン誘導的にCre遺伝子を発現)マウスを交配させ、目的とするマウス(Runx1 flox/-Mx1CreTg+)が得られた。これらのマウスにインターフェロンを投与し、目的とする造血組織においてRunx1遺伝子が正しく欠損されているかどうかを解析する。これらのマウスに誘導的にRunx1を欠落させ、Runx1野生型および欠損型の造血組織からRNAを抽出する予定である。
2.ES細胞を用いた造血分化の細胞生物学的機能の解析
ES細胞を用いた造血器細胞分化の系を構築する。ES細胞をEPO,G-CSF,GM-CSF,TPOなどのサイトカイン存在下にメチルセルロース上で培養することにより、成体型造血細胞を得ることを目的とする。
3.GATA1-PU.1トランスジェニックマウスの作製
GATA-1プロモーター下にPU.1を発現するベクターを構築し、トランスジェニックマウスの作製を試みたが、目的とするマウスが得られなかった。E10までの胎仔にさかのぼり解析したが、Tg遺伝子は検出されなかった。原因としてこのマウスが胎生致死であることや技術的な問題が考えられた。GATA-1プロモーター以外のプロモーターによる発現について検討中である。
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