骨再生機序解明への新しい戦略ー高気圧酸素負荷環境下における骨代謝についてー

2006 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18592187
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 佐々木 匡理 九州大学, 大学病院, 助手 (30346803)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 窪田 泰孝 九州大学, 大学病院, 講師 (60205151) ; 白砂 兼光 九州大学, 歯学研究院, 教授 (30093420)
• Keywords: 骨再生 / 高気圧酸素負荷 / 骨芽細胞 / 破骨細胞

Research Abstract

高気圧酸素負荷の効果を細胞レベルで解明することを目的に、高気圧酸素負荷を与えられる加圧チャンバーを利用して、各種細胞株(RAW264.7(破骨細胞)、MC3T3-E1(骨芽細胞)、SaOS-2(骨肉腫細胞株))における細胞増殖能の解析(MTSアッセイ)を行った。RAW264.7、MC3T3-E1、SaOS-2を96穴プレートに1×10^4個播種し、37℃、5% CO_2、気相下で一晩培養を行い、翌日から加圧チャンバー内で100%酸素を入れて2気圧とした状態で15分、20分、30分、40分、60分×各1回、60分×2回(2日間)、20分×3回(3日間)高気圧酸素負荷を行った。その後、37℃インキュベーターにて(1)1日、(2)3日培養を行い、MTSアッセイにて細胞増殖能を解析した。コントロールとして、37℃、5% CO)_2気相下で培養したもの用いた。各細胞株についてコントロールを1として相対比で検討した結果、RAW264.7:(1)0.78〜1.08倍(2)0.89〜1.27倍、MC3T3-E1:(1)0.93〜1.08倍(2)0.99〜1.12倍、SaOS-2:(1)0.88〜1.07倍(2)0.99〜1.08倍とすべての細胞株において増殖能に有意差はみられなかった。今回の結果より、高気圧酸素負荷環境は細胞増殖能に影響を及ぼさないことが示唆された。現在、さらに負荷条件を変えて増殖能について解析を行うとともに、分化能に対する影響について解析中である。