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2008 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト化学物質受容体を発現するレポーター酵母ライブラリーの樹立と環境スクリーニング

Research Project

Project/Area Number 18651028
Research InstitutionOsaka Prefecture University

Principal Investigator

八木 孝司  Osaka Prefecture University, 産学官連携機構, 教授 (80182301)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 川西 優喜  大阪府立大学, 産学官連携機構, 助教 (70332963)
Keywords核内受容体 / 酵母 / 環境化学物質 / 人体影響 / オーファンレセプター
Research Abstract

ヒトには核内受容体が現在約50種類の核内受容体が知られており、我々は、遺伝子組換え技術によってヒト細胞の核内受容体応答系を酵母に構築することを経て、リガンド物質が作用すれば溶液が発色する簡便迅速なバイオアッセイ系を樹立する。そのため、種々の核内受容体、核運搬タンパク遺伝子、各々の受容体応答配列を持つレポータープラスミドを酵母に導入し、各種受容体に対する被験物質の結合能を培養液の発色によって測定するバイオアッセイ系を樹立してきた。
平成20年度は樹立したアッセイ酵母に、さらに核内受容体のコアクチベーターであるSRC-1を導入し、検出感度を上げた。これまでにAhR、RXR(retinoid X receptor)α・β、ER(Estrogen Receptor)α・β、TR(thyroid hormone receptor)α・β、AR(androgen receptor)、GR(glucocorticoid hormone receptor)、VDR(vitamine D receptor)、PXR(Pregnane X receptor)、FXR(Farnesoid X receptor)などがほぼ樹立できた。既知リガンド物質を用いて、これらの酵母とヒト細胞の応答性を比較検証した結果、応答性が両者で一致するリガンドとそうでないリガンドがあることがわかった。奈良盆地から大阪湾へ注ぐ大和川の各地の河川水の主な核内受容体リガンド活性を比較した結果、天然のERリガンドと思われる物質が竜田川から大和川へ流入していることがわかった。またある地点より下流で未知のTRリガンド物質が検出され、現在その物質を同定中である。

  • Research Products

    (3 results)

All 2009 2008

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Establishment of Reporter Assay Yeasts Expressing Human Estrogen Receptors α and β with a Coactivator SRC-1 applicable for detection of estrogenic activity of environmental samples.2009

    • Author(s)
      Wai-Ling Chu, Kazuhiro Shiizaki, Masanobu Kawanishi, Takashi Yagi.
    • Journal Title

      Environmental Toxicology (印刷中)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Construction of a Reporter Yeast Strain to Detect Estrogen Receptor Signaling through Aryl Hydrocarbon Receptor Activation2008

    • Author(s)
      Kawanishi, M., Kondo, M., Shiizaki, K., Chu, W. L., Terasoma, Y., Yagi, T.
    • Journal Title

      Environmental Science and Technology 42

      Pages: 6897-6902

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ヒトアンドロゲン受容体および甲状腺ホルモン受容体発現レポーター酵母を用いた内分泌撹乱物質のアッセイ2008

    • Author(s)
      江端真吾, 浅井翔太, 椎崎一宏, 川西優喜, 八木孝司.
    • Organizer
      日本環境変異原学会第37回大会
    • Place of Presentation
      沖縄コンベンションセンター、那覇市
    • Year and Date
      2008-12-05

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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