2007 Fiscal Year Annual Research Report
光化学反応を利用した細胞情報入力の時空制御システムの開発
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18651069
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
佐甲 靖志 The Institute of Physical and Chemical Research, 佐甲細胞情報研究室, 主任研究員 (20215700)
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| Keywords | 上皮成長因子 / 神経成長因子 / ケージド化合物 / 可視化計測 |
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| Research Abstract |
EGF(NGF)-Ras-MAPKシステムを主要な応用例として、ケージド情報伝達分子を合成し、光化学反応による情報入力制御法を開発することを目標とする。光で活性制御可能な情報伝達分子の合成、ケージド情報伝達分子をガラス基盤に結合する方法の開発、デジタルミラーデバイス(DMD)を応用した照射光学系の作成が開発要素である。
昨年度に引き続きケージド情報伝達分子の開発を行った。ケージド分子の生理活性を評価する方法を種々検討し、GFP-ERK2を安定に発現したPC12細胞において、EGFもしくはNGFによって起こるGFP-ERK2の細胞質から核への局在変化を観察し、細胞の応答率をもって活性を評価する方法が最も安定であることが分かった。この方法で、ケージドEGFの粗製品を評価したところ、非ケージドEGFに比べて1/30〜1/100に活性が低下していることが分かった。また、UV照射によるケージド解除で、元の1/10〜1/3まで活性が回復した。ケージド化による不活性化、UVによるケージド解除とも実用化にはまだ不十分である。そこで化合物の精製と光解除反応の評価のため、逆相クロマトグラフィーを用いて、反応物を分析・精製する方法を確立した。今後、精製された各分画の生理活性評価と、光解除条件の検討を行う。NGFに関してもケージド化を進めている。
照射光学系の設計を行い、DMDデバイスとPCのインタフェースを作成して動作確認を行った。今後、照射系を既設の落射蛍光顕微鏡に組み込む。
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