• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2006 Fiscal Year Annual Research Report

蛋白質結晶構造解析に基づく新たな心不全治療薬デザインのための基礎研究

Research Project

Project/Area Number 18659068
Research InstitutionYamaguchi University

Principal Investigator

乾 誠  山口大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (70223237)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 木村 佳弘  山口大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (90301308)
今田 勝巳  大阪大学, 大学院・生命機能研究科, 助教授 (40346143)
Keywords心筋小胞体 / カルシウム輸送調節 / ホスホランバン / 蛋白質精製 / 蛋白質結晶 / 2次元結晶 / 3次元結晶
Research Abstract

心臓収縮力の調節では、心筋細胞内Ca^<2+>の貯蔵部位である筋小胞体(SR)を介するCa^<2+>輸送が主要な役割を果たす。心筋SRのCa^<2+>輸送は、Ca^<2+>ポンプATPaseとその調節蛋白質ホスホランバンによる蛋白質間相互作用によりもたらされ、調節されている。さらに、心不全などの病的状態においても心筋SRのCa^<2+>輸送異常が深く関与していることが明らかになっている。本研究では、ホスホランバンを標的とし、ホスホランバンとCa^<2+>ポンプATPaseの相互作用を阻害する新たな心不全治療薬を直接にデザインするための基礎検討を行うことを目的として、ホスホランバンの大量精製を行い蛋白質結晶作成のためのスクリーニングを行った。ホスホランバンの精製では、まず大腸菌からの精製を行った。質量分析計による解析から、発現段階でN末端の切断が起こっていることが判明した。そこで、N末端の修飾が行われる昆虫細胞でバキュロウイルスを用いて発現させ、大量精製することに成功した。これを用いて結晶化条件を検討する。ホスホランバンの細胞質ドメインでは、PDZドメインとMyc、6xHisを加えた融合蛋白質を作成した。これをNi-NTAカラムで精製することにより、大量の大量の融合蛋白質を得ることが出来た。これを用いて結晶化条件の検討を行った結果、未だサイズは小さいが結晶を作る条件を見出した。さらに、条件の最適化を行い高分解能の構造解析可能な結晶の作成を行う予定である。

  • Research Products

    (4 results)

All 2007 2006

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 1 results)

  • [Journal Article] Promotion of skin epithelial cell migration and wound healing by a 2-benzazepine derivative.2007

    • Author(s)
      Kenji Matsuura
    • Journal Title

      European Journal of Pharmacology 563

      Pages: 83-87

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Promotion of corneal epithelial wound healing by a tetrapeptide (SSSR) derived from IGF-1.2006

    • Author(s)
      Naoyuki Yamada
    • Journal Title

      Investigative Ophthalmology and Visual Science 47

      Pages: 3286-3292

  • [Journal Article] Correlation of proliferative and anti-apoptotic effects of HGF, insulin, IGF-1, IGF-2, and EGF in SV40-transformed human corneal epithelial cells.2006

    • Author(s)
      Ryoji Yanai
    • Journal Title

      Experimental Eye Research 83

      Pages: 76-83

  • [Journal Article] PDZRN3 (LNX3, SEMCAP3) is required for the differentiation of C2C12 myoblasts into myotubes.2006

    • Author(s)
      Ji-Ae Ko
    • Journal Title

      Journal of Cell Science 119

      Pages: 5106-5113

URL: 

Published: 2008-05-08   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi