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2007 Fiscal Year Annual Research Report

過形成副甲状腺に対する遺伝子導入とアポトーシス誘導に関する分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number 18689020
Research InstitutionJichi Medical University

Principal Investigator

椎崎 和弘  Jichi Medical University, 医学部, 助教 (10423930)

Keywords慢性腎不全 / 二次性副甲状腺機能亢進症 / 遺伝子導入 / ビタミンD受容体 / Ca感知受容体 / アポトーシス
Research Abstract

基礎的研究に有用な副甲状腺細胞のcell lineなどがないため、遺伝子導入を用いて標的遺伝子または遺伝子産物の過剰発現や発現の抑制による副甲状腺細胞の変化を検討する研究方法を確立するため、アデノウイルスをベクターとした遺伝子導入システムを開発した。
さまざまな濃度のアデノウイルスを副甲状腺内に直接注入し、経時的に副甲状腺を摘出し、副甲状腺細胞におけるアデノウイルスの感染状況を検討することで、至適ウイルス濃度と効果を検討するための至適なタイミングを明らかにした。これらの結果をもとに、vitamin D receptor(VDR)およびCa-sensing receptor (CaSR)のcDNAを導入したアデノウイルスを副甲状腺細胞に感染させ、これらの遺伝子産物の副甲状腺細胞における発現量と機能の変化を検討した。なお、コントロールとしてLacZを導入したアデノウイルスを用いた。免疫組織化学的手法により、これらのウイルスが感染した副甲状腺では、これらの発現も著明に増加していることが確認された。また、前者ではビタミンDに、後者ではCaに対する副甲状腺の感受性の改善もみられ、導入した標的遺伝子または遺伝子産物の機能も確認された。さらに、これらの遺伝子を導入後、それぞれビタミンDまたはCaの投与後に副甲状腺細胞のアポトーシス誘導の変化について、TUNEL染色、DNA電気泳動、電子顕微鏡による形態学的評価により検討した。これらの治療を受けた副甲状腺では、TUNEL陽性副甲状腺細胞数が有意に高値であり、DNA電気泳動および電子顕微鏡的に副甲状腺細胞のapoptosis誘導が確認された。こうした変化はビタミンDやCaの投与量に依存して増加していた。
本研究により、遺伝子導入を用いて標的遺伝子または遺伝子産物の過剰発現や発現の抑制による副甲状腺細胞の変化を検討する研究方法を確立することができた。さらに副甲状腺細胞の機能の調節に重要な役割を持つビタミンDやCaとアポトーシスの関係も明らかにすることができた。

  • Research Products

    (5 results)

All 2008 2007

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Direct injection of calcitriol or its analog abnormal gene expression in the byperplastic parathyroid gland in uremia.2008

    • Author(s)
      Shiizaki K, Fukagawa M, Yuan Q, Hatamura I, Nii-Kono T, Saji F, Shigematsu T, Akizawa T
    • Journal Title

      Am J Nephro1 28

      Pages: 59-66

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Binding of highly concentrated maxacalcitol to the nuclear vitamin D receptors of parathyroid cells.2007

    • Author(s)
      Shiizaki K, Hayakawa N, Imazeki I, Hatamura I, Okada T, Negi S, Sakaguchi T, Shigematsu T. Akizawa T
    • Journal Title

      Nephrol Dial Transplant 22

      Pages: 1078-1086

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Maxacalcitol improve the skeletal abnormalities due to vitamin D deficiency via independent pathway of vitamin D receptor.2007

    • Author(s)
      Shiizaki K, Hatamura I, Sakaguchi T, Imazeki I, Akizawa T, Shigematsu T, Kusano E
    • Organizer
      40th Annual Meeting of American Society of Nephrology.
    • Place of Presentation
      San Francisco
    • Year and Date
      20071031-1105
  • [Presentation] Calcitriol and its analog successfully elongate survival period and improve the skeletal growth via independent pathway of vitamin D receptor.2007

    • Author(s)
      Shiizaki K, Hatamura I, Sakaguchi T, Imazeki I, Kato S, Akizawa T, Kusano E
    • Organizer
      27th Annual Meeting of the American Society for Bone and Mineral Research.
    • Place of Presentation
      Honolulu
    • Year and Date
      20070916-19
  • [Presentation] Possibility of vitamin D receptor independent Ca regulation of maxacalcitol.2007

    • Author(s)
      Shiizaki K, Imazeki I, Hayakawa N, Hatamura I, Sakaguchi T, Negi S, Shigematsu T, Kato S, Akizawa T
    • Organizer
      44th Congress of the European Renal Association European Dialysis and Transplant Association.
    • Place of Presentation
      Barcelona
    • Year and Date
      20070621-24

URL: 

Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

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