2008 Fiscal Year Final Research Report

Crystallization of tetracycline efflux protein

Research Project

Project/Area Number	18770086
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Structural biochemistry
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	NAKASHIMA Ryosuke Osaka University, 産業科学研究所, 助教 (20379100)
Project Period (FY)	2006 – 2008
Keywords	膜タンパク質 / 結晶化 / 構造解析 / 立体構造 / 薬剤耐性
Research Abstract	本タンパク質は非常に不安定で、従来結晶化に適した標品を得るのが困難であったが、酸性条件下で精製することにより安定な標品が得られることを見いだした。また、基質を認識・結合するが輸送能を失ったG141C変異体は、LacYのC154G変異体同様に結晶化にとって有用であることが予想される。これらの変異体・条件を用いてさらなる精製条件を検討した結果、ドデシルシュークロース、ノニルチオマルトシドを用いた場合に最も良好な標品が得られた。