F-BARドメインタンパクによる細胞膜の形状制御機構

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18770165
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 伊藤 俊樹 Kobe University, 大学院・医学系研究科, 准教授 (30313092)
• Keywords: リン脂質 / F-BARドメイン / FBP17 / Fes / Fer / チロシンキナーゼ

Research Abstract

本年度はF-BAR/EFCドメインを持つチロシンキナーゼサブファミリーFerのアクチン骨格制御における役割を解析した。COS7細胞内にGFP-Ferを発現させるとlamellipodia構造を誘起し、この構造を優性不活性型Racの共発現によって抑制された。チロシンキナーゼ活性を持たないFer D742Rや自己リン酸化部位の変異体であるFer Y714Fではこのような現象は観察されなかった。興味深いことに、F-BAR/EFCドメインを欠損した変異体(Fer・F-BAR)においてもlamellipodia形成を誘起することは出来なかった。さらに、COS7細胞内にGFP-FerおよびMycタグを付加したCortactin(F-アクチン重合タンパク質)およびVav2(RacGEF)を共発現したところ、Ferのチロシンキナーゼ活性依存的なチロシンリン酸化が認められた。また、上述のようなGFP-Ferの過剰発現によって誘起されたlamellipodiaには、GFP-Ferと内在性Cortactinのリン酸化部位に対する特異的抗体(抗pTyr421)のシグナルが共局在することが観察された。
これらの結果はFerチロシンキナーゼがF-BARドメインを介したリン脂質との相互作用によって細胞膜に局在し、その形状を制御すると同時に(1)Cortactinのチロシンリン酸化によるRacの活性化、(2)Vav2のリン酸化によるRacの活性化を引き起こすことによってlamellipodia形成を誘導することを示唆している。

Research Products

• [Journal Article] Casein kinase 2-interacting Protein-1,a novel Akt pleckstrin homology domain-interacting protein, down-regulates PI3K/Akt signaling and suppresses tumor growth in vivo. (2007)
  • Author(s): Tokuda E, Fujita N, Oh-hara T, Sato S, Kurata A, Katayama R, Itoh T, Takenawa T, Miyazono K, Tsuruo T.
  • Journal Title: Cancer Research 67(20) Pages: 9666-9676
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Ferチロシンキナーゼによるリン脂質結合と生体膜の形状制御 (2007)
  • Author(s): 伊藤俊樹, 竹縄忠臣
  • Organizer: 日本生化学会、日本分子生物学会合同大会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜
  • Year and Date: 2007-12-15
• [Presentation] Use of phosphoinositide-binding domains for the quantification and visuazation of D3-phosphoinositides in cancer cells (2007)
  • Author(s): 伊藤俊樹, 及川司, 辻田和也, 竹縄忠臣
  • Organizer: 日本細胞生物学会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場
  • Year and Date: 2007-05-30