胆汁遠心上清からのk-ras・p53変異検出による胆嚢上皮超早期癌病変の同定

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18790253
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 柳澤 信之 Kitasato University, 医学部, 講師 (80337914)
• Keywords: 人体病理学 / 胆嚢 / 発癌 / PCR-SSCP / K-ras / p53

Research Abstract

我々は非胆嚢癌症例の胆汁上清最大400例でk-ras・p53遺伝子異常を各々以下のように検出している。
・胆汁上清におけるk-ras遺伝子変異検出率(SSCP法による):Total case:400 cases 〔Amplification:331 cases(83%)〕Mutation(by Bile supernatant SSCP):20 cases(6.0%)exon 1:18 cases(5.4%)、exon 2:3 cases(0.9%)
・胆汁上清におけるp53遺伝子変異検出率(SSCP法による):Total case:325 cases 〔Amplification:294 cases(90%)〕Mutation(by Bile supernatant SSCP):18 cases(6.1%)exon 5:2 cases(0.7%)、exon 6:2 cases(0:7%)、exon 7:6 cases (2.0%)、exon 8:5 cases(1.7%)、exon 9:3 cases (1.0%)
一部の症例(3例)において、p53遺伝子変異は胆汁上清のDirect Sequence法によっても確認された(exon 8 codon282: CGG-TGG、2例・exon 9 codon329: ACC-ATC、1例)。
・パラフィン切片上の非腫瘍性粘膜上皮群からも両遺伝子変異がSSCP法のシフトバンドとして検出されたが、その結果が不安定であること・Direct Sequence法では明らかな変異が同定出来なかったことから、現在新たな解析方法(SNPs検出)による追加実験を行い検討中である.