2006 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子改変マウスを用いたADAMTS13のin vivo機能解析
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18790671
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| Research Institution | National Cardiovascular Center Research Institute |
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Principal Investigator |
坂野 史明 国立循環器病センター(研究所), 脈管生理部, 室員 (00373514)
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| Keywords | ADAMTS13 / Adamts13-ノックアウトマウス / フォンビルブランド因子 / 血栓性血小板減少性紫斑病 / 血小板 / コンジェニックマウス |
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| Research Abstract |
【ADAMTS13欠損マウスの解析】ADAMTS13はフォンビルブランド因子(VWF)の切断を介して過剰な血小板凝集を抑制しており、本酵素活性の欠乏は血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)の発症につながる。我々はADAMTS13研究におけるモデル動物として、Adamts13-ノックアウトマウスを作製した。Adamts13-ノックアウトマウスは正常に出生し、明らかなTTP症状(血小板減少、溶血性貧血、微小血管内への血小板血栓沈着)は呈さない。しかし、その血中には、血小板凝集活性の強い超高分子量VWFマルチマーが残存することを確認していた。そこで本年度は、フローチャンバーシステムを用いたin vitroずり応力下血小板血栓形成試験、コラーゲン投与によるin vivo血栓誘発試験により、ADAMTS13欠損がマウスに潜在的な血栓傾向を生じさせるか否か検証した。その結果、in vitro、in vivoいずれの解析系においても、Adamts13-ノックアウトマウスは野生型マウスに比べて有意な血栓傾向を示すことが判明した。したがって、マウスにおいてADAMTS13の先天的欠損は、血中に超高分子量VWFマルチマーの残存を引き起こし、易血栓傾向をもたらすが、それだけではTTP発症に十分でないことが明らかとなった。
【ADAMTS13-C末端領域欠損マウスの作製】我々は多系統マウスのAdamts13遣伝子解析を行い、一部の系統のマウスにADAMTS13のC末端領域欠損を引き起こす変異が自然発生していることを見出した。変異により欠損する領域には、ADAMTS13に特徴的な機能未知のドメインが含まれる。そこで本年度はこの自然発生変異を利用して、Adamts13-ノックアウトマウスと同じ遺伝的背景をもちつつ、C末端領域欠損型のADAMTS13を発現するコンジェニックマウスを作製した。次年度は、これらのマウスを用いてADAMTS13のC末端領域の生理的意義を検証する。
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