有用糸状菌、二形性酵母において生体膜リン脂質が果たしている役割の総合的理解

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18H02119
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 堀内 裕之 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (00209280)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 糸状菌 / 二形性酵母 / リン脂質 / 菌糸生長 / 形態形成

Outline of Annual Research Achievements

本研究では産業上有用な糸状菌Aspergillus oryzaeとアルカン資化性で脂質生産等に利用されている二形性酵母Yarrowia lipol yticaを対象として、各種リン脂質の合成に関わる遺伝子の破壊株、それらの発現を人為的に制御できる株群を作製し、個々のリン脂質の成分含 量を変化させた株のセットを作製する。これらの株のうち、特徴的なリン脂質組成変化を示した菌を対象として、各種オルガネ ラにおけるリン脂質組成・分布の変化を検討するとともに、それぞれの株の形態変化、性質の変化を検討する。得られた結果か ら、A. oryzaeとY. lipolyticaにおけるそれぞれ有用な性質と各種リン脂質と関係を明らかにするとともに、酵母型細胞と糸状 形態型細胞での異同をも含めて各種リン脂質が果たしている役割を総合的に理解することを目的としていた。
本年度はまずY. lipolyticaにおいて数種の遺伝子破壊株の作製を行いその破壊株の種々の表現型の解析を行った。しかし、破壊株のリン脂質組成の変化の検討を行う予定であったLC-MS/MSの機械に不測の故障が生じ、使用ができなくなったためその部分の解析が進まなかった。
また。A. oryzaeにおいてはリン脂質合成に関わると考えられる数種の遺伝子について5'-RACE法を用いた転写開始点の決定、イントロンの位置の確認等を行った。また、A. oryzaeにおいてはこれまで菌体内リン脂質成分の含量解析を行なったことがなかったため、その解析法の検討を行った。その結果、A. nidulansにおいて当研究室で行なっているリン脂質成分の解析法と類似の方法での解析が可能であることが明らかとなった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本年度は取得した遺伝子破壊株について、そのリン脂質組成の変化をも決定する予定であったが、脂質の分析に必要な機器が故障しその測定が行えなかった。

Strategy for Future Research Activity

次年度は本年度に続いて遺伝子発現制御株、遺伝子破壊株の作製を行いその表現型の変化を検討するとともに、作製した変異株の脂質組成の解析法として、より簡便な新規方法に変更することを検討する予定である。