2018 Fiscal Year Annual Research Report
Glycocalyx（細胞表面糖鎖層）によるBリンパ球活性化制御の研究
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18H02610
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
鍔田 武志 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (80197756)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
王 継揚 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 特任講師 (80231041)
赤津 ちづる 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教 (60735984)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | Bリンパ球 / proximity labeling / シスリガンド / Siglec / CEACAM-1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
CD22はシアル酸を認識するSialic acid-binding immunoglobulin-like lectin (Siglec)ファミリーの膜タンパク質で、主にB細胞に発現し、もっぱら同じ細胞に発現する膜分子(シスリガンド)とシアル酸を介して会合している。Proximity labeling法の１つSPPLAT法を用いてCD22の新規シスリガンドの同定を行い、CEACAM1分子がCD22とシアル酸依存的に会合していることを明らかにした。CEACAM1がシスリガンドとしてCD22に会合することの意義を明らかにするため、CEACAM1欠損マウスB細胞におけるCD22の機能を解析したが、正常B細胞と違いは認めず、CEACAM1はCD22のシスリガンドではあるが、CD22の機能には影響しないことが明らかとなった。一方、CD22のシスリガンドがBCR架橋の際のCD22の抑制機能を減弱し、その結果BCRシグナル伝達を増強することが明らかになっている。CD22同士もシアル酸依存的に結合することから、CD22に会合したSHP-1が近傍のCD22を脱リン酸化することで、CD22の機能を減弱させる可能性を検討した。まず、CD22がSHP-1の直接の基質であることを明らかにした。ついで、SHP-1のdominant negative formの発現によりSHP-1の機能を阻害したところ、CD22のシアル酸認識を阻害してもCD22のリン酸化増強が起こらなくなった。これらの結果は、CD22がシスリガンドとしてのCD22のシアル酸を認識することでclusterを形成すると、CD22にリクルートされたSHP-1が近傍のCD22を脱リン酸化することでCD22の抑制機能を阻害することを強く示唆する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
シスリガンドとして新たにCEACAM-1分子を同定した。CEACAM-1欠損マウスを用いてCEACAM-1がCD22の機能を制御するかの解析を行なったが、CEACAM-1がCD22の機能を制御するという結果は得られなかった。一方、CD22が近傍のCD22をシスリガンドとして認識しクラスターを形成することで、CD22と会合するチロシンホスファターゼSHP-1が近傍のSHP-1を脱リン酸化することで、CD22の抑制性機能を減弱させることを明らかにした。このように、これまで不明であった、シスリガンドがどのようにしてCD22の機能を制御するかを解明することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
CEACAM-1がCD22の機能を制御するという知見は得られなかったが、逆方向の制御、すなわちCD22がCEACAM-1の機能を制御するかの解析を行う。また、SPPLAT法と質量分析を組み合わせることで、新規CD22シスリガンドの同定を行い、その機能解明を行うことで、CD22とシスリガンドの相互作用の解明を進める。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] CD22-binding synthetic sialosides regulate B lymphocyte proliferation through CD22 ligand-dependent and independent pathways, and enhance antibody production in mice.2018
Author(s)
Matsubara, N., Imamura, A., Yonemizu, T., Akatsu, C., Yang, H., Ueki, A., Watanabe, N., Abdu-Allah, H., Numoto, N., Takematsu, H., Kitazume, S., Tedder, T. F., Marth, J. D., Ito, N., Ando, H., Ishida, H., Kiso, M. and Tsubata, T.
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Journal Title
Front. Immunol.
Volume: 9
Pages: 820
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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