2019 Fiscal Year Annual Research Report
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18H02707
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
松本 有樹修 九州大学, 生体防御医学研究所, 准教授 (60741519)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | Long non-coding RNA / ポリペプチド / 脳 / 精神疾患 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでに8個の候補ポリペプチドを同定しており、昨年同様に、これらの解析を進めることにより疾患との関連を明らかにしていく。本年度は、主に以下の解析を行った。
(1) FLAGなどのタグ配列をノックインしたマウスの作製を行った。昨年度は2種のポリペプチドに関しては作成を行い、ウエスタンブロットにより内在性のポリペプチドの発現を証明したが、今年度はさらに追加で2種のポリペプチドのタグノックインマウスの作成を行い、発現の証明を行った。これらの結果より、われわれが同定したポリペプチドの大部分はIn vivoにおいても間違い無く翻訳されていることが明らかとなってきた。
(2) これらポリペプチドのうちのひとつは核移行シグナルを持ち核内に局在していた。昨年度までに、HDAC3複合体を形成するサブユニットの全てと非常に強く結合していること、及びRNA-seq解析によりKOマウスの脳でトランスクリプトームが変化していることなどを明らかにした。本年度はKOマウスの網羅的行動解析を行ったところ、KOマウスは前肢の軽度な筋力低下、活動量の増加、社会性の異常、恐怖刺激に対する記憶想起の低下など、様々な異常を示すことが明らかとなった。これらの結果より、新規ポリペプチドの欠損によりHDAC3複合体の活性に障害が生じ、ヒストンアセチル化状態の変化に起因する脳内のトランスクリプトームの変化により、様々な行動異常を示すということが考えられる。新規ポリペプチドは非常に小さな分子であるにも関わらず、生理的にも重要な機能を持つことが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計４種のタグノックインマウスを作製して内在性の発現を確認行ったことから、これら新規ポリペプチドが脳内でも間違い無く翻訳されていることを証明した。このことは、他の４種の新規ポリペプチドも翻訳されていることを強く示唆しており、今後確認を行っていく。さらにノックアウトマウスの行動解析を行ったところ、様々な行動異常を示すことが明らかとなった。このことは、これら新規ポリペプチドが機能性であることを示している。これら成果より、おおむね順調に進展していると言える。
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| Strategy for Future Research Activity |
(1)HDAC3と結合しているポリペプチドに関しては、タグノックインマウスやヒストンアセチル化に対する抗体などを用いてChIP-seqを行う。ヒストンのアセチル化の状態、及びこのポリペプチドがどの遺伝子領域に結合しているかなどを検討することにより、このポリペプチドがHDAC3をどのように制御しているかを明らかにしていく。
(2) 残りの４種のポリペプチドに関しても同様に、タグノックインマウスを作製して、内在性の発現を確認していく。さらに、ノックアウトマウスの表現型の解析や、分子機構の解明などを進めていく。
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[Journal Article] Intragenic antagonistic roles of protein and circRNA in tumorigenesis2019
Author(s)
Guarnerio J, Zhang Y, Cheloni G, Panella R, Mae Katon J, Simpson M, Matsumoto A, Papa A, Loretelli C, Petri A, Kauppinen S, Garbutt C, Nielsen GP, Deshpande V, Castillo-Martin M, Cordon-Cardo C, Dimitrios S, Clohessy JG, Batish M, Pandolfi PP.
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Journal Title
Cell Research
Volume: 29
Pages: 628～640
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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