日本人特異的肺障害に関与するMUC4分子内責任配列同定に関する研究

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18H02820
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 萩原 弘一 自治医科大学, 医学部, 教授 (00240705)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 薬剤性肺障害 / 日本人 / MUC4

Outline of Annual Research Achievements

分子生物学的反応系を工夫し，MUC4反復配列を次世代シークエンサーMiSeqにのせるための反応系を確立した．得られた塩基配列データは高次の反復配列構造を取っているため，専用のアセンブルプログラムを開発し，アセンブルが可能になった．
日本人200例の制限酵素断片長多型のうち，4種の発現ベクターをBAC中に作成した．これをpUC系plasmidに移し，大量精製を可能にした．ERRB2，ERBB3のstable transfectantを作成した．これをCOS7に導入し、800kDaの巨大タンパクだが，発現することを確認した。
MUC4全長塩基配列が決定可能になったため，このシステムで各DNAを解析して行けば，１）MUC4反復配列中の3塩基挿入配列認識システムの完成．２）各民族DNAのスクリーニング．３）日本人各肺障害DNAでの3塩基挿入のスクリーニング，が自動的に達成されることになる．一回のMiSeqランで20サンプル程度が決定可能なため，今後はスクリーニングが順調に進むと考えられる．
EGFR遺伝子変異陽性肺癌患者におけるMUC4遺伝子多型とEGFR-TKIによる肺障害発症との相関性を検証するためのコホート内ケースコントロールスタディ - NEJ022A - UMIN ID：UMIN000015612の症例集積を終了した．EGFR遺伝子変異陽性でEGFR阻害薬による治療を計画している症例の末梢血を，薬剤投与前に採取．薬剤投与後に症例を観察し，肺障害を発症した患者を中央判定，一名の発症者に対し，10名の非発症者をコホートから無作為に選択する．平成30年度までに432例が登録され，11名が肺障害を発症．この時点で登録終了とした．この11名がケースとなる．非発症者から無作為に選択した88名をコントロールとした．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

EGFR遺伝子変異陽性肺癌患者におけるMUC4遺伝子多型とEGFR-TKIによる肺障害発症との相関性を検証するためのコホート内ケースコントロールスタディ - NEJ022A - UMIN ID：UMIN000015612の症例集積を終了した．開発したMUC4反復配列解析システムを用い，解析を開始しているため．

Strategy for Future Research Activity

EGFR遺伝子変異陽性肺癌患者におけるMUC4遺伝子多型とEGFR-TKIによる肺障害発症との相関性を検証するためのコホート内ケースコントロールスタディ - NEJ022A - UMIN ID：UMIN000015612のMUC4反復配列の解析を継続し，MUC4の薬剤性肺障害責任配列同定を行う．