2019 Fiscal Year Annual Research Report
A new molecular therapy using (pro)Renin Receptor for gliomas
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18H02913
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| Research Institution | Kagawa University |
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Principal Investigator |
田宮 隆 香川大学, 医学部, 教授 (50252953)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小川 大輔 香川大学, 医学部附属病院, 助教 (70524057)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | glioma / molecular therapy / proRenin receptor |
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| Outline of Annual Research Achievements |
グリオーマ細胞株に対する(p)RR抗体の抗腫瘍効果をin vitroにおいて評価する実験において、まず、U87MG,U251,T98Gなどグリオーマ細胞株について、(p)RRの発現について検討した。脳腫瘍細胞において、グレードやグリオーマの予後規定因子であるIDH-1変異に関わらず(p)RRが恒常的に発現しており、さらに悪性化に伴い(p)RR発現量が増加していることを確認した。また、(p)RRをsmall interference RNA (siRNA)でノックダウンすると、細胞の増殖能は抑制された。このことから、(p)RRがグリオーマの腫瘍形成において、IDH-1変異以前の初期段階にドライバー分子として重要な働きを担っていることを我々は示した。
次に、(p)RR抗体を用いて(p)RRの働きを抑制することで、ドライバー分子を失ったグリオーマの腫瘍形成能は失われるか？について解明するために、これらの細胞株を用いて、(p)RR抗体の抗腫瘍効果を検討した。U87MG,U251,T98Gなどグリオーマ細胞株に、(p)RR抗体を投与し、Reporter assayにより、(p)RRとはWnt/βカテニン経路を抑制することで、グリオーマに対し、抗腫瘍効果を発揮していることを明らかとした。また、増殖能、アポトーシス等を検討すると、(p)RR抗体は濃度依存性に腫瘍増殖能を抑制することを明らかとした。さらに、TMZを併用投与による検討では、相加効果が認められた。
以上より、グリオーマ細胞株に対する(p)RR抗体の抗腫瘍効果をin vitroにおいて確認できた。最終年度は、(p)RRのグリオーマ形成に関わる分子生物学的メカニズムの解明のための実験やIn vivoにおけるグリオーマ細胞株に対する(p)RR抗体の抗腫瘍効果を検討する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
U87MG,U251,T98Gなどグリオーマ細胞株について、グレードやグリオーマの予後規定因子であるIDH-1変異に関わらず(p)RRが恒常的に発現しており、さらに悪性化に伴い(p)RR発現量が増加していることを確認した。また、(p)RRがグリオーマの腫瘍形成において、IDH-1変異以前の初期段階にドライバー分子として重要な働きを担っていることを確認した。さらにU87MG,U251,T98Gなどグリオーマ細胞株に、(p)RR抗体を投与し、Reporter assayにより、(p)RRとはWnt/βカテニン経路を抑制することで、グリオーマに対し抗腫瘍効果を発揮していることを明らかとした。また、(p)RR抗体は濃度依存性に腫瘍増殖能を抑制し、TMZを併用投与により相加効果が認められた。以上、今年度の実験計画に基づいて結果が得られており、順調な進捗状況と考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
昨年度に続き、グリオーマ細胞株に対する(p)RR抗体の抗腫瘍効果をin vitroにおいて評価する。さらにグリオーマ幹細胞株や神経幹細胞について詳細な検討を行う。
次に、(p)RRのグリオーマ形成に関わる分子生物学的メカニズムの解明のために、正常神経膠細胞やiPSから分化誘導したヒト神経幹細胞に(p)RRを強制発現させ、腫瘍化するか、増殖能の変化や腫瘍形成能について評価を行う。
また、In vivoにおいては、グリオーマ細胞株に対する(p)RR抗体の抗腫瘍効果を皮下腫瘍モデルにおいて検討する。各種グリオーマ細胞株を免疫不全マウス（Athmic nude）の皮下に移植し、(p)RR抗体またはコントロールとして対照抗体を、皮下腫瘍内に直接組織内投与し、その抗腫瘍効果をin vivoにて比較する。
最終年度であり、上記をまとめ報告し論文化し、可能であれば、臨床応用に向けて計画する。
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