53BP1の生体維持機構：DNA損傷修復からアポトーシス細胞への免疫寛容誘導まで

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18H03375
• Research Institution: Kanazawa Medical University
• Principal Investigator: 岩淵 邦芳 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10232696)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 砂谷 優実 金沢医科大学, 医学部, 講師 (70581057) ; 松井 理 金沢医科大学, 医学部, 助教 (60288272) ; 逆井 良 金沢医科大学, 医学部, 講師 (10549950)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: DNA損傷 / アポトーシス / 53BP1

Outline of Annual Research Achievements

アポトーシス細胞の細胞膜表層にはアポトーシスのごく初期から断片化されたヌクレオソームが露出してくるが、露出の分子メカニズムは不明である。アポトーシス細胞表層のヌクレオソームは、食細胞によるアポトーシス細胞の貪食を助ける。アポトーシス細胞の速やかな貪食・除去は、自己免疫疾患を防ぐうえで極めて重要である。研究代表者は、DNA二重鎖切断修復タンパク質である53BP1が、アポトーシス細胞表層へのヌクレオソーム露出に関与していることを見出した。本研究は、アポトーシスにおける53BP1の役割を明らかにすることを目的とする.
研究代表者はこれまでに、ヒトT細胞系白血病細胞株Jurkatにスタウロスポリンでアポトーシスを誘導すると、①53BP1がカスパーゼ依存性に60 kDaのC末断片になること、②この53BP1C末断片が、クロマチンと共に細胞表層へ露出することを見出している。
今年度は、アポトーシス細胞において53NP1C末断片が、実際にクロマチンと結合しているかどうかを免疫沈降法で調べた。その結果、アポトーシス誘導前には、細胞の可溶性分画においてfull size 53BP1はヒストンH4と共沈しなかったが、アポトーシス細胞では、53BP1C末断片がヒストンH4と共沈することが確認された。アポトーシス細胞において53BP1C末断片がクロマチンと挙動を共にしていることが示唆された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

53BP1ノックアウトマウスを用いたin vivo実験が遅れているため。

Strategy for Future Research Activity

53BP1ノックアウトマウスを用いたin vivo実験を推進する。