53BP1の生体維持機構：DNA損傷修復からアポトーシス細胞への免疫寛容誘導まで

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18H03375
• Research Institution: Kanazawa Medical University
• Principal Investigator: 岩淵 邦芳 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10232696)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 逆井 良 金沢医科大学, 医学部, 講師 (10549950) ; 松井 理 金沢医科大学, 医学部, 助教 (60288272)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: DNA損傷 / アポトーシス / 53BP1

Outline of Annual Research Achievements

アポトーシス細胞の細胞膜表層にはアポトーシスのごく初期から断片化されたクロマチンが露出してくるが、露出の分子メカニズムは不明である。アポトーシス細胞表層のクロマチンは、食細胞によるアポトーシス細胞の貪食を助ける。アポトーシス細胞の速やかな貪食・除去は、自己免疫疾患を防ぐうえで極めて重要である。研究代表者は、DNA二重鎖切断修復タンパク質である53BP1が、アポトーシス細胞表層へのクロマチン露出に関与していることを見出した。本研究は、アポトーシスにおける53BP1の役割を明らかにすることを目的とする.
遅れていたマウス飼育ケージが導入されたため、野生型マウスと53BP1ノックアウトマウスから採取した脾臓リンパ球にアポトーシスを誘導し,53BP1欠損細胞では、アポトーシス細胞表層へのクロマチン露出が低下することを再確認した。
53BP1はTudor domainを介してDNA損傷部位のヒストンと結合する。アポトーシス細胞においても、Tudor domainとヒストンとの結合を介して、53BP1C末断片がクロマチンと結合したまま、細胞表層に露出する可能性がある。そこで、siRNAで53BP1発現を抑制したJurkat 細胞に、野生型あるいはTudor domain変異型（ヒストンと結合できない変異）の53BP1を戻し、アポトーシスでのクロマチンの細胞表層露出を調べた。その結果、Tudor domain変異型53BP1を戻したアポトーシス細胞では、53BP1発現抑制により低下クロマチンの細胞表層が回復しなかった。アポトーシス細胞におけるクロマチンの細胞表層露出は、53BP1のTudor domain依存性であることが示唆された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

53BP1ノックアウトマウスを使ったin vivo実験が遅れているため。

Strategy for Future Research Activity

53BP1ノックアウトマウスを使ったin vivo実験を推進する。