2020 Fiscal Year Annual Research Report
CRISPRライブラリースクリーニングによるリンパ腫発症の遺伝子基盤の統合的理解
| Project/Area Number |
18H04035
|
|---|
| Research Institution | National Cancer Center Japan |
|---|
Principal Investigator |
片岡 圭亮 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 分野長 (90631383)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白石 友一 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (70516880)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | 悪性リンパ腫 / CRISPR |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
成人T細胞白血病リンパ腫や節外性NK/T細胞リンパ腫などの難治性リンパ腫における網羅的な遺伝子解析により多数の新規遺伝子異常が同定されてきたが、その多くで生物学的な役割は不明なままである。本研究では、CRISPRスクリーニングを用いて、難治性リンパ腫で認められる機能喪失型の異常がリンパ腫発症に果たす役割を高効率に解明することを目指す同時に、リンパ腫発症に寄与することが判明した遺伝子異常を個別に導入することで、様々な遺伝子異常を持つリンパ腫モデルを得ることを目指す。さらに、同モデルを用いて、遺伝子異常に応じた分子病態や薬剤感受性の違いを明らかにすることを試みる。
3年の研究期間において、難治性リンパ腫で機能喪失型異常が生じる遺伝子を標的とするsgRNAライブラリーを複数種類作成し、Cas9発現マウスの造血幹前駆細胞分画に導入し、同系マウス200匹以上に移植した。その結果、移植後約50～300日程度で80%以上のマウスにおいて、B細胞性・T細胞性のリンパ系腫瘍、および、骨髄系腫瘍など様々な造血器腫瘍の発症を認めた。また、アンプリコンシーケンスにより、発症した腫瘍で濃縮されているsgRNAを検索した結果、骨髄系腫瘍ではCebpaなどの遺伝子、T細胞系腫瘍ではTrp53などの遺伝子、B細胞系腫瘍ではKmt2dなどが多く認められ、腫瘍の病型により濃縮される標的遺伝子が異なることが示された。これら以外に、in vivoで造血器腫瘍の発症に関わることが新規に検証可能であった遺伝子が複数認められ、現在個別に検証中である。これらの結果は、本in vivoスクリーニング法により、リンパ腫発症に関与する遺伝子が同定可能であることを示している。
|
| Research Progress Status |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
|
| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
|
