2018 Fiscal Year Research-status Report
High Performance Analysis of Biomacromolecules by combining organogel electrophoresis and on-line sample preconcentration techniques
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18K05162
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
北川 文彦 弘前大学, 理工学研究科, 准教授 (20362452)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 分離分析 / チップ分析 / 電気泳動分析 / オンライン試料濃縮 / グラジエント溶離 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
試料リザーバーから目的成分を供給しながらカラム全体に注入した試料溶液も濃縮するLVSEP-FASI法と非水系溶媒を用いるキャピラリーゲル電気泳動 (NACGE法) を組み合わせるため，マイクロチップ電気泳動における検討を行った。ポリマーとしてHPMCを添加したメタノール泳動液を用いてLVSEP-FASI-NACGE分析を行ったところ，試料リザーバーの液面を1 mm高くしたときには，早い時間に鋭いピークが観測され，濃縮率は1170倍となったのに対し，液面差を5 mmとすると，ピーク形状は悪くなり，泳動時間も大きく遅くなったものの，濃縮率は2100倍に達した。このような液面差による圧力流の流速制御により，泳動時間・ピーク形状・濃縮率を調整可能であり，また，マイクロチップ上におけるLVSEP-FASI法とNACGE分析の結合も可能であることが示された。
一方，NACGEとグラジエント溶離の結合について，アニオン種の分析を可能とするためにDMAPやDABCOなどのアミン類をグラジエント剤として検討した。PVA, HPMC, PVPをポリマーとして，アニオン性金属錯体を通常のNACGEにより分析した結果とDMAPおよびDABCOを用いたグラジエント溶離を比較したところ，すべてのポリマーと添加剤の組み合わせでグラジエント溶離の効果により鉄錯体の検出時間が大きく短縮された。例えば，1.0% PVA (Mw 85000, DS 99%) と0.25% LiBrを含むDMSO溶液を用いた場合，通常のNACGE分析では鉄錯体は14.7 minに検出されたのに対し，0.25%のDMAPを用いるグラジエント溶離では検出時間は6.9 minまでに減少した。したがって，アニオン種のNACGE分析においても，アミン類を添加剤として検出側から泳動させることにより，グラジエント溶離を実現できることがわかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実施計画に記載したLVSEP-FASI-NACGE法の開発，NACGE-グラジエント溶離法の開発のいずれも順調に進展しているため
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画通り，LVSEP-FASI-NACGE法の進展ならびにNACGE-グラジエント溶離法の生体分析への応用を目指して研究を進めていく。
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| Causes of Carryover |
研究を進めるための消耗品費（主に有機溶媒などの試薬費）が予想よりも大きくなり，購入予定だった高速CCDカメラの購入を断念したため，次年度使用額が生じてしまった。この金額をすべて次年度の消耗品費（試薬費）に回すことで，研究のさらなる進展を図る。
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Research Products
(9 results)
