2019 Fiscal Year Research-status Report
適度なアルコール摂取による動脈硬化予防効果の分子メカニズム基盤の確立
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18K05488
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
臼井 真一 岡山大学, 保健学研究科, 准教授 (50346417)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
廣畑 聡 岡山大学, 保健学研究科, 教授 (90332791)
柴倉 美砂子 岡山大学, 保健学研究科, 准教授 (30314694)
篠畑 綾子 岡山大学, 保健学研究科, 助教 (70335587)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | HDL / エタノール / リポ蛋白代謝 / コレステロール |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1.前年度に引き続き，HepG2細胞のHDL生合成におけるエタノールの影響を検討した。ゲルろ過クロマトグラフィによる解析ではエタノールにより培養上清中のHDL-コレステロールの増加傾向，HDL粒子径の大型化，LDLコレステロールの増加が見られた。これらの変化がどのようなメカニズムによるものなのか，HDL代謝に直接的に関与する蛋白質（ABCA1, HTGL, LCAT，CETPなど）についてウエスタンブロット解析を実施したが，これまでの検討ではエタノールによる明らかな変動は認められなかった。また，コレステロール代謝やLDL代謝の変化が間接的にHDL代謝へ影響を及ぼしている可能性を考え，SREBP2, CYP7A1, MTP, LDLレセプターなどの蛋白発現も分析したが，いずれも一定の傾向をもった結果が得られなかった。
2.今年度は新たに動物実験を開始した。１％エタノールをSDラットに自由摂取させ，10週後に血清および各臓器を採取した。飼料と飲料の摂取量はコントロール群（水飲料）に比べエタノール摂取群で少ない傾向があったが，体重変化には有意差が見られなかった。肝臓組織はエタノールによる脂肪肝の発症は見られず，肝障害のマーカーである血清ALT，AST値もコントロール群と有意差がなく良好な結果であった。血清脂質分析では，エタノール摂取により総コレステロールの減少傾向が見られ，HDL-コレステロールは予想に反して減少傾向であった。血清アポE濃度およびHDL-アポE濃度は低下していた。HDLサブクラス解析では，アポE-rich HDLが減少傾向であった。脂質組成では，HDLの遊離コレステロール比率が減少している傾向が見られた。これらの結果は，アルコール摂取がHDL-コレステロール量だけでなく，クオリティーの変化に関与している可能性を示唆している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
動物実験の準備に時間を要し，開始時期が当初予定よりも遅れた。また，既報や予想と異なるデータがしばしば得られ，再実験などで時間を要したことから，「やや遅れている」と判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度に採取した動物組織の分析を中心に実験を進める。HDL生合成に深く関与する肝臓や小腸などを対象に，HDL代謝関連蛋白質，コレステロール代謝関連蛋白質の遺伝子発現，蛋白質発現を評価していく。これまでの動物実験ではエタノール摂取による血清脂質変化が予想よりも小さかったため，エタノール濃度を上げた動物実験を追加することを考えている。
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| Causes of Carryover |
実験動物の遺伝子発現解析が予定よりも遅れており，実験に必要な試薬等の費用に差異が生じた。令和元年度の未使用額は次年度分と合わせて，主に遺伝子発現解析にあてる予定である。
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