2020 Fiscal Year Annual Research Report
Rapid large scale VLP vaccine production by genome edited insect cells
Project/Area Number |
18K05551
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Research Institution | Ochanomizu University |
Principal Investigator |
馬橋 英章 お茶の水女子大学, 基幹研究院, 助教 (40785937)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | 昆虫細胞 / ウイルス様粒子 / ワクチン |
Outline of Annual Research Achievements |
前年に引き続き、JEVのPrMとEタンパク質を昆虫細胞に一過的に大量発現することによりVLPを調製した。VLPの精製にはショ糖密度勾配遠心とゲルろ過クロマトグラフィーによって行った。2段階の精製後、SDS-PAGEで夾雑タンパク質を確認したところ、2本の主要なタンパク質が共に得られることが明らかとなった。この2本のバンドを切り出し、エドマン分解に供して部分アミノ酸配列を得た。この部分アミノ酸配列をもとにBLAST検索を行い、相同性を有するタンパク質を検索したが、残念ながら100%一致するタンパク質は同定できなかった。これはおそらく夾雑タンパク質が、部分切断をされているタンパク質であるか、それとも未だデータベースには登録されていないタンパク質である可能性が考えられた。
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