2020 Fiscal Year Annual Research Report
Development of research on SLC transporters important for sperm function: Toward drug discovery and elucidation of the mechanism of fertility acquisition
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18K06016
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| Research Institution | Shizuoka University |
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Principal Investigator |
与語 圭一郎 静岡大学, 農学部, 准教授 (60362844)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安西 尚彦 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (70276054)
永森 收志 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (90467572) [Withdrawn]
宗 修平 浜松医科大学, 医学部, 特任助教 (30647607)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 精子 / 受精能獲得 / SLC22A14 / マウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、①Slc22a14輸送基質の同定とその輸送特性の解明、②Slc22a14のヒト精子における発現解析と男性不妊との関係性の解明、③Slc22a14ノックアウトマウス精子における受精能獲得不全のメカニズムの解明、の３つを目的に研究を進めている。
①に関しては，昨年度までの研究から種々の実験を行ったものの，技術的な問題の壁に当たり研究を進展させることができなかった。②については，ヒトSLC22A14タンパク質の発現や細胞内局在の解析に必要な抗ヒトSLC22A14抗体の作製を行った。ヒトSLC22A14のC末端にある細胞内ドメインをGST融合型タンパク質として大腸菌で発現・精製したものを抗原としてウサギに免疫した。得られた抗血清をアフィニティー精製しその特異性について検証を行ったところ，293細胞で強制発現させたヒトSLC22A14を強く認識していることが分かった。しかし，同抗体を用いてヒト精子におけるSLC22A14をウエスタンブロットで検出したところ，予想とはかなり異なる分子量の位置にシグナルが得られた。このシグナルがSLC22A14のものかどうかについては現時点では同定できていない。③については，昨年度までにSLC22A14欠損精子では，受精能獲得において重要な役割を果たす重炭酸イオンの流入やそれに伴う細胞内pHの上昇に異常があることを見出していた。本年は，精子において発現することが知られている（あるいは推測される）重炭酸イオントランスポーターやプロトントランスポーターの発現について調査した。その結果，少なくともmRNAレベルではいずれのトランスポーターの発現低下は見られなかった。昨年度までの知見を考え合わせると，欠損マウス精子では精子に発現する重炭酸イオンやプロトントランスポーターの機能に異常が生じており，それが受精能獲得能の低下である可能性が考えられる。
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Research Products
(1 results)
