2018 Fiscal Year Research-status Report
酵母におけるミトコンドリアオートファジーの制御機構と生理的意義の統合的理解
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18K06129
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
古川 健太郎 新潟大学, 医歯学系, 特任助教 (20754493)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | ミトコンドリア / オートファジー / マイトファジー / 酵母 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
機能低下に陥ったミトコンドリアを選択的に分解するミトコンドリアオートファジー(以下、マイトファジー)は、酵母からヒトまで保存されたミトコンドリアの品質管理機構である。酵母においてマイトファジーが誘導されると、ミトコンドリア外膜タンパク質Atg32がカゼインキナーゼ2(CK2)によってリン酸化され、それに続くAtg32の集積する部位が分解標的として切り離され、最終的に液胞内で分解される。しかしながら、ミトコンドリアのどのような異常が誘導シグナルとしてAtg32のリン酸化を制御しているのかは未解明である。前年度までの研究(若手研究B)において、CK2と競合しAtg32の脱リン酸化を介してマイトファジーを抑制するプロテインホスファターゼPpg1とその結合パートナーであるFar複合体(Far3、Far7、Far8、Far9、Far10、Far11)を見出していた。本研究では、マイトファジー誘導前後におけるPpg1とFar複合体の制御機構を解明することを目的としている。平成30年度は、これまでの研究成果をまとめ、論文発表(Cell ReportsとAutophagy)を行った。引き続き、Ppg1とFar複合体の詳細な解析を行うため、これらの因子すべての抗体を作製した。また、様々なFar複合体変異株をバックグラウンドにPpg1とFar複合体の免疫沈降実験を行い、Ppg1と直接結合するFar因子を同定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Ppg1とFar複合体がAtg32の脱リン酸化を介してマイトファジーを抑制することを論文発表することができたこと、各種抗体の準備が完了したこと、Ppg1と直接結合するFar因子を同定したことから、おおむね順調に進展しているとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
Ppg1とFar複合体各因子の結合マップを作成する。また、Ppg1とFar因子の結合状態がマイトファジー誘導前後で変化するか、それを司る上流シグナル伝達経路は何かを解明する。
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| Causes of Carryover |
外国人留学生が本研究に参加することになったため、当初予定していた研究補助員の雇用を取りやめたため未使用額が生じた。2019年度は、酵母用の培地と消耗品、タンパク質解析試薬、DNA解析試薬に加えて、成果を論文発表および学会発表するための費用に使用する。
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