2019 Fiscal Year Research-status Report
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18K06327
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
黒川 大輔 東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 助教 (40342779)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 一年魚 / 発生休止 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
東アフリカの明瞭な雨期乾期がある地帯に生息し、乾期には発生休止して雨期に発生する一年魚(Nothobranchius Korthausae)を用いて、これまでその分子メカニズムがあまり解析されていない 脊椎動物の発生休止を解析し、このような機能が、通常の胚発生をする近縁種からいかにして進化してきたか理解することを目指して研究を行なっている。 2019年度は、これまでの研究で見つかった発生休止に関わる可能性がある遺伝子の欠失突然変異体を、CRISPR/Cas9によるゲノム編集により作出した突然 変異体ホモ接合体において発生休止にどのような変化があるかを解析している。ゲノム編集により、突然変異の導入は認められたが、突然変異を導入した系統は維持が難しく、解析に十分量のホモ接合体を得るに至っていない。現在、これらの突然変異体がなぜ脆弱なのか？ヘテロでも表現系を示すのか、等の可能性を検討中であり、2020年度も引き続き解析を続ける予定である。 また、発生休止に伴う細胞周期の変化を解析するためにFucciトランスジェニック系統を樹立して発生休止に伴う細胞分裂周期の動態を共焦点レーザー顕微鏡を用いたタイムラプス観察を行なっている。これらの研究に関しては長時間の観察において卵が動いてしまうという課題があったが、低融点アガロースに埋め込むなどの工夫によって固定することには成功し、正常発生についてはタイムラプス画像を得ることができている。今後は休眠誘導時や休眠から覚醒する際にどのような細胞周期の変化が見られるのかを観察する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
【研究実績の概要】に述べたとおり、突然変異体の継代が難しく、表現系の評価について確定的な結果を得ることができていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
突然変異体の表現形解析とトランスジェニック系統のタイムラプス観察を行い、データをまとめて論文発表目指す。
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| Causes of Carryover |
(理由）
トランスジェニック系統および突然変異体を引き続き飼育するため
(使用計画)
実験終了までトランスジェニック／突然変異体系統を維持する
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Research Products
(1 results)
