2020 Fiscal Year Annual Research Report
Exploring a facilitative glycoside transporter in mammalian cells
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18K06760
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
井上 勝央 東京薬科大学, 薬学部, 教授 (50315892)
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2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | トランスポーター / 配糖体 / GBA3 / 有機アニオントランスポーター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度の研究において、HEK293細胞に内因性の配糖体トランスポーターが存在することが示唆されたため、本年度は配糖体トランスポーターの分子実体を同定するための手がかりを得るため、その輸送機能について評価した。実験は、Lifeact-GBA3安定発現HEK293細胞および内因性GBA3を発現するHuh-7細胞を用い、配糖体の蛍光アナログである4-methylumbelliferoneの各種配糖体（4-MU-Glc、-Gal、-Ara）の細胞内移行に伴う蛍光強度の変化を測定した。その結果、各種4-MU配糖体の取り込みに基づく蛍光強度は、細胞外pHの低下により、増大することが示された。さらに、その輸送は、配糖体であるイカリインや配糖体アグリコンであるケルセチンおよび胆汁酸誘導体などにより阻害されることが示された。また、同様の輸送特性はHuh-7細胞を用いた輸送実験においても認められた。フラボノイドによる阻害が報告されている各種有機アニオントランスポーター（OAT1、OAT3、OATP1B1、OATP1B1およびOATP1B3）および各種有機カチオントランスポーター（OCT1～3）の一過性発現細胞において、4-MU-Glcの取り込みに基づく蛍光強度に有意な変化は認められなかった。以上のことから、配糖体の取り込みにはグルコーストランスポーターや有機アニオン・カチオントランスポーター以外のpH依存性トランスポーターが関与する可能性が示唆された。
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