ヒト腎臓における薬物尿細管分泌の予測・評価系の構築

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K06766
• Research Institution: Ritsumeikan University
• Principal Investigator: 桂 敏也 立命館大学, 薬学部, 教授 (10283615)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 薬物トランスポーター / 尿細管分泌 / 経細胞輸送 / 薬物相互作用 / 培養細胞

Outline of Annual Research Achievements

薬物輸送研究には薬物トランスポーターを発現させた培養細胞などの発現系が汎用されるが、多くは過剰発現でありヒト個体における発現量とは異なっている。また多様なトランスポーターを同時に発現させた生理的条件に近い系の確立は困難である。従って、ヒト腎臓における薬物の尿細管分泌の程度や各トランスポーターの寄与率を、in vitro評価系から予測する方法が確立されているとは言い難い。本研究は、薬物トランスポーターの発現制御や腎臓の発生・分化を担う転写因子に着目し、そのcDNAをヒト腎由来の培養細胞に導入することによって薬物トランスポーターの発現を誘導し、薬物の尿細管分泌を評価しうる試験系を確立することを目的とする。
本年度は、転写因子 Hepatocyte nuclear factor (HNF) -1αとHNF4αに着目し、ヒト由来培養腎上皮細胞HK-2にこれらのcDNAを安定発現させることを試みた。HNF1αとHNF4αのcDNAは市販品を購入し、哺乳類細胞発現ベクターに組換えた後リポフェクション法によってHK-2細胞に導入した。構築した安定発現細胞におけるHNF1αまたはHNF4αの発現は予想されるよりも低く、発現ベクターや選別用の抗生物質を変更して現在これらの安定発現細胞を構築中である。HNF1α、HNF4αをそれぞれ単独で発現させたもの、および両方を発現させた安定発現細胞を構築後、種々薬物トランスポーターの発現変動について検討するとともに、発現亢進が認められたトランスポーターについて、典型的気質を用いて輸送活性の評価を行う予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

安定発現細胞の構築が終了している予定であったが、導入した遺伝子の発現効率が悪く、現在再検討を実施しているため、若干の遅れが生じている。

Strategy for Future Research Activity

遺伝子導入用の発現ベクターや選別用の抗生物質を変更して安定発現細胞の構築に取り組んでおり、当初の研究計画に従って進める予定である。

Causes of Carryover

年度末に端数を調整して消耗品の購入を行わなかったため次年度使用額が生じているが、概ね計画通りに使用しており、次年度も当初計画通り使用する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Population pharmacokinetics and pharmacogenomics of apixaban in Japanese adult patients with atrial fibrillation (2018)
  • Author(s): Satoshi Ueshima, Daiki Hira, Yuuma Kimura, Ryo Fujii, Chiho Tomitsuka, Takuya Yamane, Yohei Tabuchi, Tomoya Ozawa, Hideki Itoh, Seiko Ohno, Minoru Horie, Tomohiro Terada, Toshiya Katsura
  • Journal Title: British Journal of Clinical Pharmacology Volume: 84 Pages: 1301-1312
  • DOI: 10.1111/bcp.13561
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ヒト組織におけるグルクロン酸抱合反応を考慮したエンタカポンの生理学的薬物速度論解析 (2018)
  • Author(s): 爲本雄太、上島 智、宮川幸典、目片茉柚、桂 敏也
  • Organizer: 日本薬剤学会 第33年会
• [Presentation] リバーロキサバンの血中トラフ濃度に及ぼす薬物動態関連遺伝子多型の影響 (2018)
  • Author(s): 桑田健司、上島 智、平 大樹、山根拓也、芝口 彩、田淵陽平、伊藤英樹、小澤友哉、堀江 稔、寺田智祐、桂 敏也
  • Organizer: 医療薬学フォーラム2018/第26回クリニカルファーマシーシンポジウム
• [Presentation] Population pharmacokinetics and pharmacodynamics of apixaban in Japanese patients with atrial fibrillation (2018)
  • Author(s): Satoshi Ueshima, Daiki Hira, Chiho Tomitsuka, Miki Nomura, Yuuma Kimura, Takuya Yamane, Yohei Tabuchi, Tomoya Ozawa, Hideki Itoh, Seiko Ohno, Minoru Horie, Tomohiro Terada, Toshiya Katsura
  • Organizer: 18th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 生理学的薬物速度論に基づくエンタカポンの体内動態解析 (2018)
  • Author(s): 爲本雄太、上島 智、宮川幸典、目片茉柚、桂 敏也
  • Organizer: 日本医療薬学会第2回フレッシャーズ・カンファランス
• [Presentation] アミオダロンの代謝に及ぼす血液凝固第Xa因子阻害薬の影響 (2018)
  • Author(s): 芝口 彩、上島 智、平田華鈴、平野尋大、桂 敏也
  • Organizer: 日本医療薬学会第2回フレッシャーズ・カンファランス
• [Presentation] リバーロキサバンの血中濃度と臨床検査値及び薬物動態関連遺伝子多型の相関解析 (2018)
  • Author(s): 桑田健司、上島 智、平 大樹、山根拓也、田淵陽平、伊藤英樹、小澤友哉、堀江 稔、寺田智祐、桂 敏也
  • Organizer: 日本医療薬学会第2回フレッシャーズ・カンファランス
• [Presentation] Association of genetic polymorphisms in drug transporters and enzymes with plasma concentrations of rivaroxaban in Japanese patients with atrial fibrillation (2018)
  • Author(s): Satoshi Ueshima, Daiki Hira, Takuya Yamane, Kenji Kuwata, Yohei Tabuchi, Tomoya Ozawa, Hideki Itoh, Minoru Horie, Tomohiro Terada, Toshiya Katsura
  • Organizer: 2018 International Meeting on 22nd Microsomes and Drug Oxidations and 33rd Japanese Society fot the Study of Xenobiotics
  • Int'l Joint Research