2019 Fiscal Year Research-status Report
細胞極性蛋白質複合体による上皮タイトジャンクション形成の制御機構
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18K06934
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
鎌倉 幸子 九州大学, 医学研究院, 講師 (80398081)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 上皮細胞 / 細胞極性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脊椎動物の体は６割以上が上皮細胞で構成され、この細胞が作る圧倒的な面積のシートが体内と体外の環境を隔て、脊椎動物の生命を支えている。上皮細胞は、外界に接するapical膜と体内側に接するbasolateral 膜という 性質の異なる細胞膜ドメインを持ち、機能的にも形態的にも細胞極性を持つ。この２つの膜ドメインを分かつのが タイトジャンクション (tight junction: TJ) であり、TJの形成には、細胞極性の制御に関わる蛋白質複合体「Par-aPKC複合体」(aPKC: atypical protein kinase C) が必要であることがよく知られている。しかしながら、この3者複合体がTJ形成を促進する際の機序については不明な点が多い。申請者は最近、Par-aPKC 複合体に結合する膜貫通型タンパク質 ParTR1を同定し、TJ形成の強力な負の調節因子であることを見出した。本研究は、この新規TJ調節因子ParTR1に対するPar-aPKC複合体の作用機序、細胞及び個体レベルでのParTR1の機能の解析を軸に、Par-aPKC複合体によるTJ形成の制御メカニズムを解明する。これまでの実験から、ParTR1とClaudin-1タンパク質が結合することを見出していたが、本年度は、この結合に関わるTMEM25側のタンパク質領域を明らかにした。また、ParTR1がClaudin-1及びclaudin-2の各々のcis 結合をParTR1が抑制すること等を見出していたが、さらにtrans 結合についても抑制すること等を明らかにした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画通りに研究が進捗しているため
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| Strategy for Future Research Activity |
ParTR1の結合蛋白質の探索：ParTR1によるClaudin1のオリゴマー化の抑制が ParTR1に結合する他の蛋白質に依存する可能性、あるいはParTR1の局在や活性が他の蛋白質によって制御される可能性を考え、新規ParTR1の結合タンパク質をMass Spectrometryを用いて探索する。FLAGタグを付加したParTR1をHEK293T細胞（ヒト胎児腎臓由来の細胞株）に過剰発現し免疫沈降する。共沈したタンパク質をMass spectrometryにより解析し、結合タンパク質の候補を明らかにする。またParTR1とClaudin1との結合をPar3が抑制する際のメカニズムについても解析を行う。
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Research Products
(1 results)
