2018 Fiscal Year Research-status Report
Analysis of molecular mechanisms of cell proliferation in BAP1-mutated cancer using synthetic lethal phenotypes
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18K06979
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
村上 優子 (渡並優子) 順天堂大学, 医学部, 准教授 (70405174)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 合成致死 / DNA損傷修復 / 悪性中皮腫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ゲノムワイドプール型レンチウィルスshRNAライブラリーを用い、悪性中皮腫、ぶどう膜黒色腫、腎淡明細胞がんなどの原因遺伝子の一つであるBAP1変異に対し、合成致死表現型を示す遺伝子をスクリーニングした。前年度までに得られた候補遺伝子のうち、DNA修復に関わる脱ユビキチン化酵素USP1とCHK2キナーゼについて集中して解析を進めることとした。
本年度は、１）肺がんのBAP1変異細胞株であるH226とBAP1野生型の細胞株H1299についてML323（USP1阻害試薬）とPV1019（CHK2阻害試薬）を培地に加えたところ、BAP1変異株であるH226のほうがよりそれらの試薬の感受性が高いことが明らかとなった。すなわち、悪性中皮腫以外のBAP1変異株についても、スクリーニングから得られた候補遺伝子産物の阻害が合成致死表現型を示すことが明らかとなった。２）７weekのBALB/c nu/nuマウスにBAP1変異細胞H226を移植し、担がん実験を行ったところ、CHK2阻害剤であるPV1019投与でコントロールに比べて有意にがんが小さくなることが確認された。つまり、培養細胞でのBAP1変異とCHK2キナーゼ阻害の合成致死性は、個体レベルでも保たれていることが明らかとなった。３）HeLa細胞においてBAP1をノックダウンするとS期の進行が遅くなるという報告があるが（Cancer Res, 2019）、BAP1が変異している悪性中皮腫株H28とH28に野生型BAP1を過剰発現させた株（H28-BAP1）において細胞周期を同調させてS期の進行をみたところ、そのような傾向は確認できなかった（未発表）。そのため、正常中皮細胞株にてBAP1をノックダウンすることで再検討を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は当初の研究計画についてほぼ予定通り進行しているため、（２）を選択した。
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| Strategy for Future Research Activity |
2018年度の進捗状況を受け、2019年度は以下のように研究を推進していく予定である。
１）2018年度までに検討した悪性中皮腫・肺がん以外のBAP1変異がん（悪性黒色腫など）についてもスクリーニングで得られた候補遺伝子のノックダウンが合成致死表現型を示すかについて検討を続ける、２）担がん実験について、CHK2阻害剤を用いてn数を増やし検討を続ける。また、USP1阻害剤についても条件検討を行う、３）BAP1とUSP1について共通の脱ユビキチン化標的を同定するために質量分析を行う、４）DNA複製時のDNA損傷修復にBAP1が関わっているかを検討する、５）Web上で公開されている、がん組織の遺伝子発現データ及び予後データを再解析し、USP1, CHK2の発現が新規予後予想因子データとなるか検討する。
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| Causes of Carryover |
担がんマウスの条件検討について次年度に一部持ち越したため次年度使用額が生じた。
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Research Products
(10 results)
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[Journal Article] A Covalent Inhibitor for Glutathione S-Transferase Pi (GSTP1-1 ) in Human Cells.2019
Author(s)
Shishido Y, Tomoike F, Kuwata K, Fujikawa H, Sekido Y, Murakami-Tonami Y, Kameda T, Abe N, Kimura Y, Shuto S, Abe H
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Journal Title
Chembiochem
Volume: 20
Pages: 900-905
DOI
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[Presentation] Upregulation of Bcl-2 confers resistance to FLT3 inhibition in FLT3-ITD AML with secondary acquired mutations.2018
Author(s)
Kotoko Yamatani, Yoko Tabe, Kaori Saitoh, Haeun Yang, Yuko Tonami-Murakami, Koya Suzuki, Weiguo Zhang, Sonoko Kinjo, Kazuho Ikeo, Kaoru Mogushi, Masaki Hosoya, Shigeo Yamaguchi, Hironori Harada9, Takashi Miida, Neil P. Shah, Yoshihide Hayashizaki, Marina Konopleva, Michael Andreeff
Organizer
61st American Society of Hematology Annual Meeting 2018
Int'l Joint Research
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[Presentation] Combined targeting of Bcl-2 and XPO1 overcomes acquired resistance to tyrosine kinase inhibitors in FLT3-ITD/TKD double mutant AML.2018
Author(s)
Yoko Tabe, Kotoko Yamatani, Haeun Yang, Kaori Saito, Yuko Tonami-Murakami, Koya Suzuki, Weiguo Zhang, Sonoko Kinjo, Kazuho Ikeo, Masaki Hosoya, Kaoru Mogushi, Shigeo Yamaguchi, Hironori Harada, Takashi Miida, Neil P. Shah, Yoshihide Hayashizaki, Marina Konopleva, Michael Andreeff
Organizer
61st American Society of Hematology Annual Meeting 2018
Int'l Joint Research
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