2019 Fiscal Year Research-status Report
筋衛星細胞の未分化性維持メカニズムの解明と筋ジストロフィー治療への応用
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18K07082
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| Research Institution | National Center of Neurology and Psychiatry |
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Principal Investigator |
林 晋一郎 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所 疾病研究第一部, 室長 (10732381)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 骨格筋 / 筋衛星細胞 / 分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
筋ジストロフィーの根治療法として骨格筋幹細胞である筋衛星細胞を移植する方法が考えられるが、生体外で筋衛星細胞の未分化な状態を保持したまま培養することが難しく、移植に十分な数の筋衛星細胞を得られないことが課題となっている。この問題を解決するには未分化維持機構の解明が必要である。本研究では筋衛星細胞の未分化維持機構を明らかにすることを目的とした。
2019年度はレチノイン酸（化合物A）と類似の化合物を筋衛星細胞培養系へ添加し、その分化抑制効果を検討した。その結果、Am80などRARアゴニストで高い分化抑制効果が見られる一方で、RXRアゴニストでは全く効果が認められず、レチノイン酸による分化抑制効果はRARを介していることが明らかとなった。次に、siRARsを用いた実験から、レチノイン酸シグナルは主にRARαを介して作用することを明らかにした。さらにRARαによる筋衛星細胞の分化抑制機序を解析するため、現在はRARα発現ベクターの作製し、解析中である。
また、筋衛星細胞の未分化性を維持する細胞外基質について検討した。近年ラミニン511-E8フフラグメントが筋衛星細胞の未分化性を維持することが報告されており、(Stem Cell Rep10: 1-10, 2018)、本研究ではこれまで筋衛星細胞の培養に一般的に用いられてきたコラーゲンI、マトリゲルとラミニンフラグメントを比較した。その結果、ラミニン511-E8が最も優れた分化抑制効果を持ち、レチノイン酸と共に培養することで相乗的に分化抑制効果をもたらすことが明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定通りに進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
前年度の計画ではChIPに使用可能なPax7の抗体が無いためにChIP-seqを行うことができなかった。そこで、本年度はPax7のC末側にタグを挿入したノックインマウスの作出を新たに計画している。これにより抗タグ抗体を用いたChIP-seqや免疫沈降-質量分析が可能となると考えられる。今後は確立した筋衛星細胞の未分化維持培養法を用いて、培養細胞の移植、およびヒト筋細胞への応用を目指す。
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[Journal Article] Association of Dermatomyositis Sine Dermatitis With Anti?Nuclear Matrix Protein 2 Autoantibodies2020
Author(s)
Inoue M, Tanboon J, Hirakawa S, Komaki H, Fukushima T, Awano H, Tajima T, Yamazaki K, Hayashi R, Mori T, Shibuya K, Yamanoi T, Yoshimura H, Ogawa T, Katayama A, Sugai F, Nakayama Y, Yamaguchi S, Hayashi S, Noguchi S, Tachimori H, Okiyama N, Fujimoto M, Nishino I
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Journal Title
JAMA Neurology
Volume: 77
Pages: 872～872
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Infantile-onset lipid storage myopathy.2019
Author(s)
Indrawati LA, Noguchi S, Tanboon J, Ogasawara M, Saito Y, Kumutpongpanich T, Inoue M, Okubo M, Fukuda T, Sugie H, Goto Y, Iida A, Hayashi S, Nishino I
Organizer
24th International Congress of the World Muscle Society
Int'l Joint Research
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