2019 Fiscal Year Research-status Report
組換え水疱性口内炎ウイルスを用いたSFTSに対する治療および予防ワクチンの開発
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18K07144
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
谷 英樹 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (20397706)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | SFTSV / 組換えVSV / ワクチン抗原 / SFTSV擬似粒子 / ISAAC法 / 中和抗体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
重症熱性血小板減少症候群（SFTS）ウイルス（SFTSV）によるSFTSに対して、特異的な治療薬やワクチン等はまだ確立されておらず、こうした抗SFTSV薬の研究や開発は喫緊の課題であると思われる。本研究では、種々の方法を駆使して感染を防御できるような抗体医薬品の開発を試みる。昨年度から引き続きSFTSVのエンベロープ遺伝子を挿入した組換えVSVの作製に取り組んだものの、組換えVSVが得られなかったため、並行して行っている一回感染性のSFTSV擬似粒子（SFTSV-SRIPs）の作製およびその応用を中心に行った。昨年度、SFTSV-SRIPsを細胞内で効率良く作製できることを明らかにできたので、次にこのSFTSV-SRIPsがワクチン抗原として利用できるか、BALB/cマウスを用いて免疫実験を行った。この抗血清をELISAおよびSFTSV-GP外套シュードタイプVSV（SFTSVpv）を用いてウイルス中和試験を行ったところ、GP抗原に対するELISA価の上昇およびSFTSVpvの中和活性を確認することができた。そこで、免疫を行ったマウスの脾臓からリンパ球を回収し、ISAAC法を用いて精製SFTSV-GPに反応する抗体産生細胞を単離し、抗体遺伝子のクローニングを行った。その結果、いくつかの抗体遺伝子が得られたものの、SFTSVpvを中和する抗体は得られなかった。これはSFTSV-SRIPs単独での免疫ではELISA価がそれほど高くなかったこともあり、次にアジュバントと混合させて再度マウスへの免疫を行った。その結果、アジュバントを加えた場合、SFTSV-SRIPs単独に比べて10倍以上のELISA価が得られ、またSFTSVpvの中和活性も高いことが示された。今後、このマウスの脾臓から得られた細胞を元に再度ISAAC法を用いて中和抗体の作製を目指す。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
組換えVSVが作製できていないものの、SFTSV-SRIPsが作製できるようになったため、こちらを抗原として実験を進めている。今年度は、目標とする抗体医薬品の作製に向けて、計画していたISAAC法を利用して抗体を作製する実験も行うことができた。実験の結果、SFTSV-SRIPs単独では抗原量が少なかったために、引き続きアジュバントを用いて追加実験まで行うことができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続きISAAC法を用いて中和抗体の作製に取り組む。今後、SFTSV-SRIPsのワクチン抗原としての応用を見据えて、マウスを用いたSFTSVチャレンジ実験に着手する。その他、SFTSV-SRIPsを欠損セグメントにコードされている遺伝子を恒常的に発現する細胞のみで増幅できるような改良型のものを作製し、より実用化できるようなワクチンベクターの開発を目指す。
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| Causes of Carryover |
（理由）本年度遂行予定だった実験が次年度にずれ込んだため。
（使用計画）使用予定だった消耗品を次年度分の消耗品として使用する。
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[Journal Article] Gold nanoparticle-adjuvanted S protein induces a strong antigen-specific IgG response against severe acute respiratory syndrome-related coronavirus infection, but fails to induce protective antibodies and limit eosinophilic infiltration in lungs.2019
Author(s)
Hanako Sekimukai, Naoko Iwata-Yoshikawa, Shuetsu Fukushi, Hideki Tani, Michiyo Kataoka, Tadaki Suzuki, Hideki Hasegawa, Kenichi Niikura, Katsuhiko Arai, Noriyo Nagata.
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Journal Title
Microbiology and Immunology
Volume: 64
Pages: 33-51
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] ミニゲノムを用いた重症熱性血小板減少症候群ウイルスのゲノム複製・転写を抑制する低分子化合物のスクリーニング2019
Author(s)
山田博司, 木村美幸, 譚 龍, 谷口 怜, 下島昌幸, 福原崇介, 松浦善治, 米納 孝,中嶋 希, 古田要介, 西條政幸, 谷 英樹
Organizer
第67回日本ウイルス学会学術集会
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