2023 Fiscal Year Annual Research Report
Maintenance mechanisms of the hepatitis B virus cccDNA
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18K07160
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science |
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Principal Investigator |
山本 直樹 公益財団法人東京都医学総合研究所, 疾患制御研究分野, 主任研究員 (10547780)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | HBV / cccDNA / HBx / 持続感染 / 低分子化合物 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HBVのゲノムDNAは、部分的に一本鎖の不完全二本鎖DNA(relaxed circular DNA: rcDNA)でウイルス粒子内に封入されている。一方、感染細胞では完全な二本鎖閉環状DNA(covalently closed circular DNA: cccDNA)として染色体とは独立して一定量維持されることで持続感染化していると考えられている。cccDNAは、核内においてウイルス蛋白質と共に複数の宿主蛋白質が結合したDNA/蛋白質複合体として存在しているが、その維持機序は不明である。研究代表者は、蛋白質-蛋白質相互作用を特異的に阻害する低分子化合物ライブラリーのスクリーニングを実施し、HBV持続感染初代ヒト肝細胞においてウイルス蛋白質(HBs抗原、HBe抗原、HBc関連抗原)、rcDNAおよびcccDNAを減少に導く6つの新規低分子化合物の取得に成功した。また、ウイルス蛋白質とrcDNAは、どちらもcccDNAを鋳型に転写されたウイルスRNAをもとにつくられることから、化合物はcccDNAを減少に導いていることが示唆された。一方、化合物のcccDNA減少効果の活性に重要な構造については、構造活性相関解析とそれをもとに新たに合成した類縁体を用いて同定することができた。次に、ウイルスライフサイクルにおける作用点を解析した結果、化合物はHBx mRNAの転写を制御するプロモーター活性を抑制していることが示された。研究代表者はこれまで、核酸アナログ製剤またはsiRNAによるウイルスの逆転写酵素の抑制だけではcccDNAの減少には不十分であるとの知見を得ていることから、HBxがcccDNAの安定的な維持に寄与していることが示唆された。
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