2020 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidating dynamin 2 functions in invadopodia formation by cancer cells and its regulation by Src
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18K07198
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
竹田 哲也 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (30302368)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 細胞浸潤 / 浸潤突起 / ポドソーム / ダイナミン / BARドメイン蛋白質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ダイナミンは，エンドサイトーシスにおける膜切断や，アクチン細胞骨格の制御に関わる，高分子量GTPアーゼである．Dynamin 2は，ダイナミンのubiquitousなアイソフォームで，細胞の周辺組織への浸潤に必要な膜構造である浸潤突起（invadopodia）やポドソーム（podosome）の構成因子であることが明らかになっていた。そこで本研究では，浸潤突起およびポドソームにおいてDynamin 2と相互作用するタンパク質についての解析を行なった．
まずtruncation断片を用いた解析により，Dynamin 2の浸潤突起およびポドソームへの局在には，C末端のproline-rich domain（PRD）が必要であることを明らかにした．Dynamin 2のPRDは，SH3ドメインを持つ他のタンパク質，特に膜リモデリング因子であるBARドメイン蛋白質と相互作用することが知られていた．そこで、共免疫沈降法を用いてDynamin 2と相互作用するBARドメイン蛋白質を探索したところ，10種類のBARドメイン蛋白質を同定した．さらに，免疫蛍光顕微鏡法により，膀胱がん細胞T24の浸潤突起に局在するBARドメイン蛋白質を9種類，さらにNIH-Src細胞のポドソームに局在するBARドメイン蛋白質を16種類同定した．Dynamin 2との結合性と，浸潤突起およびポドソームへの局在の両方を確認したBARドメイン蛋白質について優先的に機能解析を進め，多くのBARドメイン蛋白質が，細胞膜とDynamin 2を繋ぐリンカーとしての機能を持つ可能性を示した．これらのBARドメイン蛋白質のうち，特にPACSIN2について細胞浸潤における機能解析が進んでおり，現在論文を投稿準備中である．
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[Journal Article] Mutant BIN1-Dynamin 2 complexes dysregulate membrane remodeling in the pathogenesis of centronuclear myopathy2021
Author(s)
Fujise, K., Okubo, M., Abe, T., Yamada, H., Nishino, I., Noguchi, S., *Takei, K., and *Takeda, T.
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Journal Title
J. Biol. Chem.
Volume: 296
Pages: 100077-100089
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Dynamin 1 is important for microtubule organisation and stabilisation in glomerular podocytes2020
Author(s)
La, T.M., Tachibana, H., Li, S., Abe, T., Seiriki, S., Nagaoka, H., Takashima, E., Takeda, T., Ogawa, D., Makino, S., Asanuma, K., Watanabe, M., Tian, X., Ishibe, S., Sakane, A., Sasaki, T., Wada, J., Takei, K., Yamada, H.
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Journal Title
FASEB J.
Volume: 34(12)
Pages: 16449-16463
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Dysregulated membrane remodeling in pathogenesis of congenital diseases2020
Author(s)
Fujise, K., Okubo, M., Abe, T., Yamada, H., Nishino, I., Takei, K., Noguchi, S. and Takeda, T.
Organizer
第58回日本生物物理学会年会，シンポジウム「膜のリモデリングと組織化の分子基盤」
Invited
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